CellLight™ Early Endosomes-RFP, BacMam 2.0

La RFP para endosomas tempranos CellLight™, BacMam 2.0, proporciona un método sencillo para etiquetar los endosomas tempranos con proteína verde fluorescente (RFP) en células vivas. Solamente tiene que añadir reactivo a las células y dejarlas incubar toda la noche; por la mañana, las células estarán listas.

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Esta construcción lista para su uso se transfecta en las células donde expresa la RFP fusionada a la Rab5a, mediante tecnología BacMam 2.0. Puede observar el comportamiento de endosomas tempranos-RFP en células vivas independientemente del pH de los orgánulos y marcarlas con distintos colorantes de rastreo o seguimiento para la adquisición de imágenes de los procesos celulares dinámicos.

Las células que expresan construcciones CellLight™ también se pueden fijar con formaldehído para la adquisición de imágenes multiplex mediante técnicas inmunocitoquímicas.

La tecnología CellLight™ es:
• Rápida y cómoda: solamente tiene que añadir reactivo CellLight™ a las células, dejarlas incubar durante la noche y realizar la adquisición de imágenes, o bien almacenar las células congeladas listas para ensayos para utilizarlas posteriormente
• Muy eficaz: hasta un 90 % de transducción de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, incluidas las células primarias, las células madre y las neuronas.
• Flexible: cotransduzca más de un reactivo BacMam para experimentos multiplex o estudios de colocalización; controle de cerca los niveles de expresión mediante simples variaciones de la dosis.
• Menos tóxica: Los reactivos CellLight™ no se replican en células de mamíferos y son adecuados para la manipulación de nivel de bioseguridad (BSL) 1

Tecnología BacMam
CellLight™ Early Endosomes-RFP, BacMam 2.0 es una construcción fusionada de la secuencia de localización nuclear Rab5a y TagRFP que se dirige de forma precisa y específica a los endosomas celulares tempranos-RFP. Esta construcción fusionada está envasada en el baculovirus del virus de insecto, que no se replica en las células humanas y está designado como seguro para su uso en la mayoría de laboratorios con nivel de bioseguridad (BSL) 1. La tecnología BacMam garantiza que la mayoría de los tipos de células de mamíferos se transduzcan o transfecten con alta eficacia y una toxicidad mínima. Esta transfección transitoria se puede detectar tras una incubación nocturna durante hasta cinco días, tiempo suficiente para llevar a cabo la mayoría de análisis celulares dinámicos. Como cualquier otra técnica de transfección o transducción, el método BacMam no transfecta o transduce todas las células con la misma eficacia, lo que hace que no sea adecuado para estudios de población celular o procesos de recuento o adquisición de imágenes automatizados. Los reactivos CellLight™ son perfectos para experimentos en los que se requiere la colocalización celular o subcelular o para estudios de la función celular que necesiten una resolución especial.