Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging

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Invitrogen™

Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging

Markierte Calcium-Indikatoren sind Moleküle, die nach Ca2+-Bindung eine erhöhte Fluoreszenz zeigen. Sie werden bei vielen Untersuchungen zur Signalübertragung bei CalciumWeitere Informationen

Katalognummer	Menge
C3015 auch als C-3015 bezeichnet	10 x 50 μg

Katalognummer C3015

auch als C-3015 bezeichnet

Preis (EUR)

548,00

Menge:

10 x 50 μg

Preis (EUR)

548,00

Markierte Calcium-Indikatoren sind Moleküle, die nach Ca²⁺-Bindung eine erhöhte Fluoreszenz zeigen. Sie werden bei vielen Untersuchungen zur Signalübertragung bei Calcium verwendet, z. B. Messung intrazellulärer Ca²⁺ nach Ca²⁺-Zufluss und -Freisetzung sowie Bildgebung der Multiphotonenanregung von Ca²⁺ in lebendem Gewebe. Zellen können mit den AM-Esterformen dieser Calcium-Indikatoren beladen werden, indem der gelöste Indikator direkt den Schalen mit den kultivierten Zellen hinzugefügt wird. Das Fluoreszenzsignal aus diesen Zellen wird in der Regel mittels Fluoreszenzmikroskopie, Fluoreszenz-Mikrotiterplattenassays oder Durchflusszytometrie gemessen.

Weitere Informationen zu Ionenindikatoren wie Calcium-, Kalium-, pH-Wert- und Membranpotentialindikatoren ›

Calciumindikator(AM Ester)-Spezifikationen:
• Markierung (Ex/Em): Calcium Orange™ (549/576 nm)
• Steigerung der Fluoreszenzintensität bei Bindung an Ca²⁺: ∼3-fach
• Zeigt Fluoreszenzerhöhung nach Ca²⁺ Bindung mit geringer Wellenlängenverschiebung

Spektraleigenschaften von Molecular Probes™ Calciumindikatoren
Diese Sonden werden durch sichtbares Licht angeregt, und da die für die Anregung erforderliche Energie gering ist, wird das Potenzial für zelluläre Photoschäden reduziert. Häufig verwendete Laser-basierte Geräte (d. h. konfokale Laser-Scanning-Mikroskope) sind in der Lage, diese Indikatoren effizient zu erregen. Ihre Emissionen liegen in den Regionen des Spektrums, in denen zelluläre Autofluoreszenz- und Streuungshintergründe oft weniger ein Problem darstellen.

Größere Auswahl fluoreszierender Calciumindikatoren
Wir bieten eine große Auswahl von Molecular Probes™ Calciumindikatoren für den Einsatz in verschiedenen experimentellen Szenarien, zum Beispiel Dextran-Versionen für reduzierte Leckage und Kompartimentierung sowie BAPTA-Konjugate zur Erkennung von Calcium-Transienten mit hoher Amplitude. Weitere Informationen finden Sie unter Fluorescent Ca²⁺ Indicators Excited with Visible Light, Abschnitt 19.3 im Molecular Probes™ Handbuch.

Für UV-anregbare Ca²⁺-Indikatoren, Protein-basierte Ca2+-Indikatoren, Konjugate von Ca²⁺-Indikatoren und fluoreszenzbasierte Indikatoren anderer Metallionen (d. h. Mg2+, Zn2+) siehe Indikatoren für Ca2+, Mg2+, Zn2+ und andere Metallionen, Kapitel 19 im Molecular Probes™ Handbuch.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen bestimmt.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications

NachweisverfahrenFluoreszent, Fluoreszent

FarbstofftypFarbstoffbasiertes Fluoreszenzmittel

Menge10 x 50 μg

VersandbedingungRaumtemperatur, Raumtemperatur

Zur Verwendung mit (Anwendung)Viabilität und Proliferation von Zellen

Zur Verwendung mit (Geräte)Fluoreszenzmikroskop

ProduktlinieCALCIUM ORANGE

ProdukttypCalcium-Indikator

Unit SizeEach

Inhalt und Lagerung

Im Tiefkühlgerät (-5 bis -30 °C) lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The K_d value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When using Calcium Crimson, AM, as an indicator of intracellular calcium flux, I am not getting a good degree of change. The cells also have GFP. What can I do?

This is a known drawback of Calcium Crimson, AM (as well as Calcium Orange, AM and Fura Red, AM, which are also in the same emission range). You can try increasing the concentration and washing out of any unlabeled dye from the media, to try to get better signal-to-background. If that fails, we recommend using Rhod-3 AM instead, which has a much better change in signal in that wavelength.

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Zitierungen und Referenzen

Abstract

AM-loading of fluorescent Ca2+ indicators into intact single fibers of frog muscle.

Authors:Zhao M, Hollingworth S, Baylor SM

Journal:Biophys J

PubMed ID:9168048

'The AM loading of a number of different fluorescent Ca2+ indicators was compared in intact single fibers of frog muscle. Among the 13 indicators studied, loading rates (the average increase in the fiber concentration of indicator per first 60 min of loading) varied approximately 100-fold, from approximately 3 microM/h to ... More

Intracellular Ca2+ dynamics during spontaneous and evoked activity of leech heart interneurons: low-threshold Ca currents and graded synaptic transmission.

Authors:Ivanov AI, Calabrese RL

Journal:J Neurosci

PubMed ID:10864951

'In oscillatory neuronal networks that pace rhythmic behavior, Ca(2+) entry through voltage-gated Ca channels often supports bursting activity and mediates graded transmitter release. We monitored simultaneously membrane potential and/or ionic currents and changes of Ca fluorescence (using the fluorescence indicator Ca Orange) in spontaneously active and experimentally manipulated oscillator heart ... More

The role of Ca(2+) in stimulated bioluminescence of the dinoflagellate Lingulodinium polyedrum.

Authors:von Dassow P, Latz MI

Journal:J Exp Biol

PubMed ID:12200401

'Many marine dinoflagellates emit bright discrete flashes of light nearly instantaneously in response to either laminar or turbulent flows as well as to direct mechanical stimulation. The flash involves a unique pH-dependent luciferase and a proton-mediated action potential across the vacuole membrane. The mechanotransduction process initiating this action potential is ... More

Ryanodine receptor mutations associated with stress-induced ventricular tachycardia mediate increased calcium release in stimulated cardiomyocytes.

Authors:George CH, Higgs GV, Lai FA

Journal:Circ Res

PubMed ID:12919952

'Ca2+ release from the sarcoplasmic reticulum mediated by the cardiac ryanodine receptor (RyR2) is a fundamental event in cardiac muscle contraction. RyR2 mutations suggested to cause defective Ca2+ channel function have recently been identified in catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia (CPVT) and arrhythmogenic right ventricular dysplasia (ARVD) affected individuals. We report ... More

Cell-permeant Ca2+ chelators reduce early excitotoxic and ischemic neuronal injury in vitro and in vivo.

Authors:Tymianski M, Wallace MC, Spigelman I, Uno M, Carlen PL, Tator CH, Charlton MP

Journal:Neuron

PubMed ID:8102532

'We report the characterization of the first successful treatment of neuronal ischemic injury in vivo by cell-permeant Ca2+ chelators. The chelators attenuated glutamate-induced intracellular Ca2+ increases and neurotoxicity in neuronal explant cultures. When infused intravenously in rats, permeant fluorescent BAPTA analogs accumulated in neurons in several brain regions. BAPTA-AM, infused ... More

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