Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging
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Citas y referencias (28)
Invitrogen™

Calcium Orange™, AM, cell permeant - Special Packaging

Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Se puedenMás información
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Número de catálogoCantidad
C3015
también denominado C-3015
10 x 50 μg
Número de catálogo C3015
también denominado C-3015
Precio (MXN)
-
Cantidad:
10 x 50 μg
Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Se pueden utilizar en muchas investigaciones de señalización del calcio, incluida la medición de Ca2+ intracelular, tras la entrada y liberación de Ca2+ y la adquisición de imágenes de excitación multifotónica de Ca 2+ en tejidos vivos. Las células se pueden cargar como éster AM de estos indicadores calcio mediante la adición del indicador disuelto directamente a las placas que contienen las células cultivadas. La señal de fluorescencia de estas células se mide generalmente mediante microscopía de fluorescencia, ensayos de microplacas de fluorescencia o citometría de flujo.

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Indicador de calcio (éster AM) Especificaciones:
• Etiqueta (Ex/Em): Calcium Orange™ (549/576 nm)
• Aumento de la intensidad de fluorescencia al unirse con Ca2+: ∼3 veces
• Presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+ con poco cambio en la longitud de onda

Características espectrales de indicadores de calcio Molecular Probes™
Estas sondas se excitan con luz visible y dado que la energía requerida para la excitación es baja, el potencial de fotodaño celular se reduce. Los instrumentos basados en láser de uso habitual (por ejemplo, microscopios de escaneo láser confocal) son capaces de excitar eficientemente esos indicadores, y sus emisiones están en regiones del espectro donde los fondos de dispersión y autofluorescencia celular no suelen causar problemas.

Más opciones para indicadores de calcio fluorescentes
Ofrecemos una gran selección de indicadores de calcio Molecular Probes™ para su uso en diversos escenarios experimentales, por ejemplo, versiones de dextrano para reducir las fugas y la compartimentación, y conjugados BAPTA para detectar perturbaciones transitorias de calcio de gran amplitud. Para obtener más información, consulte Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light—Section 19.3 (Indicadores de Ca2+ fluorescentes excitados mediante luz visible, sección 19.3) en el manual de Molecular Probes™.

Para obtener información sobre indicadores de Ca2+ excitables mediante UV, indicadores de Ca2+ basados en proteínas, conjugados de indicadores de Ca2+ e indicadores basados en fluorescencia de otros iones metálicos (es decir, Mg2+, Zn2+) consulte Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and Other Metal Ions—Chapter 19 (Indicadores para Ca2+, Mg2+, Zn2+ y otros iones metálicos, capítulo 19) en el manual de Molecular Probes™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en animales o humanos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteA base de colorantes fluorescentes
Cantidad10 x 50 μg
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Viabilidad y proliferación celulares
Para utilizar con (equipo)Microscopio de fluorescencia
Línea de productosCALCIUM ORANGE
Tipo de productoIndicador de calcio
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

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When using Calcium Crimson, AM, as an indicator of intracellular calcium flux, I am not getting a good degree of change. The cells also have GFP. What can I do?

This is a known drawback of Calcium Crimson, AM (as well as Calcium Orange, AM and Fura Red, AM, which are also in the same emission range). You can try increasing the concentration and washing out of any unlabeled dye from the media, to try to get better signal-to-background. If that fails, we recommend using Rhod-3 AM instead, which has a much better change in signal in that wavelength.

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Citations & References (28)

Citations & References
Abstract
AM-loading of fluorescent Ca2+ indicators into intact single fibers of frog muscle.
Authors:Zhao M, Hollingworth S, Baylor SM
Journal:Biophys J
PubMed ID:9168048
'The AM loading of a number of different fluorescent Ca2+ indicators was compared in intact single fibers of frog muscle. Among the 13 indicators studied, loading rates (the average increase in the fiber concentration of indicator per first 60 min of loading) varied approximately 100-fold, from approximately 3 microM/h to ... More
Intracellular Ca2+ dynamics during spontaneous and evoked activity of leech heart interneurons: low-threshold Ca currents and graded synaptic transmission.
Authors:Ivanov AI, Calabrese RL
Journal:J Neurosci
PubMed ID:10864951
'In oscillatory neuronal networks that pace rhythmic behavior, Ca(2+) entry through voltage-gated Ca channels often supports bursting activity and mediates graded transmitter release. We monitored simultaneously membrane potential and/or ionic currents and changes of Ca fluorescence (using the fluorescence indicator Ca Orange) in spontaneously active and experimentally manipulated oscillator heart ... More
The role of Ca(2+) in stimulated bioluminescence of the dinoflagellate Lingulodinium polyedrum.
Authors:von Dassow P, Latz MI
Journal:J Exp Biol
PubMed ID:12200401
'Many marine dinoflagellates emit bright discrete flashes of light nearly instantaneously in response to either laminar or turbulent flows as well as to direct mechanical stimulation. The flash involves a unique pH-dependent luciferase and a proton-mediated action potential across the vacuole membrane. The mechanotransduction process initiating this action potential is ... More
Ryanodine receptor mutations associated with stress-induced ventricular tachycardia mediate increased calcium release in stimulated cardiomyocytes.
Authors:George CH, Higgs GV, Lai FA
Journal:Circ Res
PubMed ID:12919952
'Ca2+ release from the sarcoplasmic reticulum mediated by the cardiac ryanodine receptor (RyR2) is a fundamental event in cardiac muscle contraction. RyR2 mutations suggested to cause defective Ca2+ channel function have recently been identified in catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia (CPVT) and arrhythmogenic right ventricular dysplasia (ARVD) affected individuals. We report ... More
Cell-permeant Ca2+ chelators reduce early excitotoxic and ischemic neuronal injury in vitro and in vivo.
Authors:Tymianski M, Wallace MC, Spigelman I, Uno M, Carlen PL, Tator CH, Charlton MP
Journal:Neuron
PubMed ID:8102532
'We report the characterization of the first successful treatment of neuronal ischemic injury in vivo by cell-permeant Ca2+ chelators. The chelators attenuated glutamate-induced intracellular Ca2+ increases and neurotoxicity in neuronal explant cultures. When infused intravenously in rats, permeant fluorescent BAPTA analogs accumulated in neurons in several brain regions. BAPTA-AM, infused ... More
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