Fluo-4, AM, cell permeant
Fluo-4, AM, cell permeant
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Fluo-4, AM, cell permeant

Markierte Calcium-Indikatoren sind Moleküle, die nach Ca2+-Bindung eine erhöhte Fluoreszenz zeigen. Fluo-3 wurde zur Darstellung räumlicher Dynamiken von Ca2+-Signalwegen beiWeitere Informationen
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Markierte Calcium-Indikatoren sind Moleküle, die nach Ca2+-Bindung eine erhöhte Fluoreszenz zeigen. Fluo-3 wurde zur Darstellung räumlicher Dynamiken von Ca2+-Signalwegen bei Durchflusszytometrie-Experimenten mit Photoaktivierung von „Caged“-Chelatoren, sekundären Botenstoffen und Neurotransmittern sowie für zellbasierte pharmakologische Screenings verwendet. Fluo-4 ist ein Analog von Fluo-3, wobei die beiden Chlorsubstituenten durch Fluore ersetzt wurden, was zu einer erhöhten Fluoreszenzanregung bei 488 nm und somit zu höheren Fluoreszenzintensitäten führt. Zellen können mit den AM-Esterformen dieser Calcium-Indikatoren beladen werden, indem der gelöste Indikator direkt den Schalen mit den kultivierten Zellen hinzugefügt wird. Diese Indikatoren sind nützlich für die Fluoreszenz- und Konfokalmikroskopie, Durchflusszytometrie und Mikrotiterplatten-Screenings.

Erfahren Sie mehr über Ionen-Indikatoren wie Calcium-, Kalium-, pH- und Membranpotential-Indikatoren ›

Spezifikationen des Calcium-Indikators (AM-Ester):
• Markierung (Ex/Em der Ca2+–gebundenen Form): Fluo-4 (494/506 nm)
• Steigerung der Fluoreszenzintensität nach Ca2+-Bindung: >100-facher
• Kd-Wert für Ca2+ in Puffer: ∼335 nM
• Fluoreszenzerhöhung nach Ca2+-Bindung mit geringer Wellenlängenverschiebung


Anwendung von TPEN zur Kontrolle von Schwermetallkationen
Ferner binden BAPTA-basierte Indikatoren wie diese verschiedene Schwermetallkationen (z. B. Mn2+, Zn2+, Pb2+) mit wesentlich höherer Affinität als Ca2+. Störungen bei Calcium-Messungen durch das Vorhandensein dieser Ionen können mit dem schwermetallselektiven Chelator TPEN unter Kontrolle gebracht werden.

Mehr Auswahl für fluoreszierende Calcium-Indikatoren
Wir bieten eine große Auswahl an Molecular Probes® Calcium-Indikatoren für die Verwendung in verschiedenen experimentellen Szenarien an. Weitere Informationen finden Sie unter Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light, Abschnitt 19.3 im Molecular Probes® Handbuch.

Für UV-erregbare Ca2+-Indikatoren, Protein-basierte Ca2+-Indikatoren, Konjugate von Ca2+-Indikatoren und fluoreszenzbasierte Indikatoren anderer Metallionen (d. h. Mg2+, Zn2+) siehe Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and Other Metal Ions, Kapitel 19 im Molecular Probes® Handbuch.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke bei Menschen oder Tieren vorgesehen.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Konzentration1 mM, 1 mM
NachweisverfahrenFluoreszent, Fluoreszent
FarbstofftypFarbstoffbasiertes Fluoreszenzmittel
Menge500 μl
VersandbedingungRaumtemperatur, Raumtemperatur
Zur Verwendung mit (Anwendung)Viabilität und Proliferation von Zellen
Zur Verwendung mit (Geräte)Konfokalmikroskop, Fluoreszenzmikroskop, High-Content-Gerät, HTS-Lesegerät, Mikrotiterplatten-Lesegerät, Fluoreszenz-Bildgebungsgerät, Konfokalmikroskop, Fluoreszenzmikroskop, High Content Gerät, HTS-Lesegerät, Mikrotiterplatten-Lesegerät, Fluoreszenz-Imager
ProdukttypFarbstoff
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
In einem Tiefkühlgerät (-5 bis -30 °C) lagern und vor Licht schützen.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can I fix my cells after loading with Fluo-4 AM dye for the detection of calcium?

No. Since Fluo-4 AM isn't covalently bound to any cellular components and fixation compromises the membrane, the dye would not be retained by the cell.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Zitierungen und Referenzen (317)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Functional implications of calcium permeability of the channel formed by pannexin 1.
Authors:Vanden Abeele F,Bidaux G,Gordienko D,Beck B,Panchin YV,Baranova AV,Ivanov DV,Skryma R,Prevarskaya N
Journal:The Journal of cell biology
PubMed ID:16908669
Although human pannexins (PanX) are homologous to gap junction molecules, their physiological function in vertebrates remains poorly understood. Our results demonstrate that overexpression of PanX1 results in the formation of Ca(2+)-permeable gap junction channels between adjacent cells, thus, allowing direct intercellular Ca(2+) diffusion and facilitating intercellular Ca(2+) wave propagation. More ... More
Impaired insulin secretion and glucose intolerance in synaptotagmin-7 null mutant mice.
Authors:Gustavsson N,Lao Y,Maximov A,Chuang JC,Kostromina E,Repa JJ,Li C,Radda GK,Südhof TC,Han W
Journal:Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
PubMed ID:18308938
Vertebrates express at least 15 different synaptotagmins with the same domain structure but diverse localizations and tissue distributions. Synaptotagmin-1,-2, and -9 act as calcium sensors for the fast phrase of neurotransmitter release, and synaptotagmin-12 acts as a calcium-independent modulator of release. The exact functions of the remaining 11 synaptotagmins, however, ... More
High-throughput microfluidic mixing and multiparametric cell sorting for bioactive compound screening.
Authors:Young SM, Curry MS, Ransom JT, Ballesteros JA, Prossnitz ER, Sklar LA, Edwards BS
Journal:J Biomol Screen
PubMed ID:15006133
HyperCyt, an automated sample handling system for flow cytometry that uses air bubbles to separate samples sequentially introduced from multiwell plates by an autosampler. In a previously documented HyperCyt configuration, air bubble separated compounds in one sample line and a continuous stream of cells in another are mixed in-line for ... More
Drosophila Hsc70-4 is critical for neurotransmitter exocytosis in vivo.
Authors:Bronk P, Wenniger JJ, Dawson-Scully K, Guo X, Hong S, Atwood HL, Zinsmaier KE
Journal:Neuron
PubMed ID:11395008
'Previous in vitro studies of cysteine-string protein (CSP) imply a potential role for the clathrin-uncoating ATPase Hsc70 in exocytosis. We show that hypomorphic mutations in Drosophila Hsc70-4 (Hsc4) impair nerve-evoked neurotransmitter release, but not synaptic vesicle recycling in vivo. The loss of release can be restored by increasing external or ... More
Multiplex GPCR assay in reverse transfection cell microarrays.
Authors:Mishina YM, Wilson CJ, Bruett L, Smith JJ, Stoop-Myer C, Jong S, Amaral LP, Pedersen R, Lyman SK, Myer VE, Kreider BL, Thompson CM
Journal:J Biomol Screen
PubMed ID:15140381
'G protein-coupled receptors (GPCRs) are a superfamily of proteins that include some of the most important drug targets in the pharmaceutical industry. Despite the success of this group of drugs, there remains a need to identify GPCR-targeted drugs with greater selectivity, to develop screening assays for validated targets, and to ... More