Kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR
Thermo Scientific™

Kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR

Le kit de synthèse de l’ADNc monocaténaire Thermo Scientific Maxima pour la RT-qPCR est un système pratique optimisé pour laAfficher plus
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K1672Kit with dsDNase200 réactions
K1641Kit only50 réactions
K1642Kit only200 réactions
K1671Kit with dsDNase50 réactions
Référence K1672
Prix (EUR)
1 442,65
Offre exceptionnelle en ligne
1 658,00
Économisez 215,35 (13%)
Each
Comprend:
Kit with dsDNase
Nbre de réactions:
200 réactions
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
1 442,65
Offre exceptionnelle en ligne
1 658,00
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Each
Le kit de synthèse de l’ADNc monocaténaire Thermo Scientific Maxima pour la RT-qPCR est un système pratique optimisé pour la synthèse d’ADNc dans les applications de RT-PCR quantitative (RT-qPCR) en deux étapes. Le kit utilise la transcriptase inverse (RT) Maxima, une enzyme avancée dérivée par évolution in vitro de la RT M-MuLV. L’enzyme présente une grande thermostabilité, une robustesse et un taux de synthèse d’ADNc plus élevé par rapport à la RT M-MuLV de type sauvage.

Le kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR est capable de synthétiser de l’ADNc reproductible à partir d’une large gamme de quantités d’ARN total (1 pg à 5 μg) à des températures élevées (42 à 65°C). La réaction de synthèse peut s’effectuer en 15 à 30 minutes. Les composants du kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR sont prémélangés afin de gagner du temps et de réduire le risque d’erreurs de pipetage.

Points clés :

• Hauts rendements d’ADNc pleine longueur jusqu’à 20 kb
• Synthèse d’ADNc efficace dans une grande plage de températures allant de 42°C à 65°C
• Taux de synthèse amélioré : synthèse d’ADNc complète en 15 à 30 minutes
• Sensibilité et spécificité élevées

Applications

• RT-PCR en deux étapes
• RT-qPCR en deux étapes

Le kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR contient les éléments suivants :
• Mélange d’enzymes Maxima
• Mélange réactionnel 5X
• Eau exempte de nucléase

Informations supplémentaires relatives aux composants de la réaction
Le mélange d’enzymes Maxima contient de la transcriptase inverse Maxima et l’inhibiteur de la RNase Thermo Scientific RiboLock. L’inhibiteur recombinant de la RNase RiboLock protège efficacement les modèles d’ARN contre la dégradation par les RNases A, B et C à des températures jusqu’à 55°C maximum.

Le mélange réactionnel 5X contient les composants de réaction restants : le tampon de réaction, les dNTP, l’oligo(dT)18 et des amorces hexamères aléatoires.

De l’eau exempte de nucléase est fournie pour la configuration de la réaction et la dilution de l’ARN de l’échantillon. L’absence d’endodésoxyribonucléases, d’exodésoxyribonucléases, de ribonucléases et de phosphatases a été confirmée par des tests de qualité appropriés.

Produits associés
Kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR, avec de la DNasedb
Kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR
Mélange réactionnel (5X) pour le kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
Type de produit finalADNc premier brin
FormatKit
ComprendKit with dsDNase
Nbre de réactions200 réactions
Température de réaction optimale50°C à 55°C
Quantité200 réactions x 20°μl
Format de réactionComposants séparés
Type de réactifTranscription inverse
Transcriptase inverseMaxima
Activité de la ribonucléase HOui
Conditions d’expéditionNeige carbonique
Taille (produit final)Jusqu’à 20 kb
Matériau de départARN
TechniqueTranscription inverse
À utiliser avec (application)PCR en temps réel (qPCR)
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réaction30 min
Unit SizeEach
Contenu et stockage

• Mélange enzymatique Maxima (Transcriptase inverse Maxima et inhibiteur de RNase RiboLock)
• Reaction Mix 5X
• DNasedb
• Tampon de DNasedb 10X
• Eau sans nucléase

Stocker à 20°C.

Foire aux questions (FAQ)

How can I inactivate Thermo Scientific dsDNase?

dsDNase can be inactivated by incubating the sample at 55°C for 5 min in the presence of 10 mM DTT.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H-minus RT or Maxima H-minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. We also recommended using RNase H-minus RTs for template-independent addition of C nucleotides.

Do Thermo Scientific reverse transcriptases (RevertAid RT, RevertAid H-minus RT, Maxima RT, and Maxima H-minus RT) possess terminal deoxynucleotidyl (TdT) activity?

All Thermo Scientific reverse transcriptases possess intrinsic TdT activity although at varying degrees depending upon the reaction conditions. For addition of template-independent C nucleotides (as for SMART and RACE experiments), this specific TdT activity can be induced by Mn2+. We would recommend Maxima H- or RevertAid H- minus RTs for this purpose.

Does dsDNase cleave ssDNA?

No, dsDNase cleaves only double-stranded DNA. However, if ssDNA forms double-stranded structures, it will act as a target for dsDNase. Because of this, long and complex ssDNA may be partially degraded. Therefore we recommend additional dsDNase inactivation step for RT-PCR amplification of targets 3 kb or longer. The inactivation step should be performed by 5 min incubation at 55 degrees C in the presence of 10 mM DTT.

Can dsDNase be added directly to a reverse transcription reaction to remove genomic DNA?

No. RT reaction composition inhibits dsDNase activity, and genomic DNA removal may be incomplete.