TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli

Das TA Cloning™ Kit Dual Promoter mit PCR™II Vektor ermöglicht eine schnelle und einfache Klonierungsstrategie für direktes Einfügen eines Taq-amplifizierten PCR-Produkts in einen Plasmid-Vektor. Die T7- und Sp6-Promoter des pCR™II Vektors ermöglichen die In-vitro-Transkription des Inserts für die Herstellung von Sense- bzw. Antisense-Produkten. Das TA Cloning Kit Dual Promoter verwendet den pCR™II Klonierungsvektor und ExpressLink™ T4 DNA Ligase, um ein Ligationsprodukt in einem Ligationsschritt von fünfzehn Minuten bei Raumtemperatur zu erzeugen. Reaktionen erbringen in der Regel >80 % Rekombinationen mit Inserts.

Merkmale des TA Cloning™ Kits Dual Promoter:
• Schnell und praktisch – Ligation bei Raumtemperatur in 15 Minuten
• Effizient – Blau/Weiß-Screening und >80 % Klone mit korrektem Insert
• Flexibel – Wahl von Kanamycin- oder Ampicillin-Resistenz für eine flexible Antibiotika-Auswahl
• Sorgenfrei – Eliminiert jegliche enzymatischen Modifikationen des PCR-Produkts
• Optimiert – Erfordert keine Verwendung von PCR-Primern, die Restriktionsstellen enthalten

Der pCR™II Vektor bietet:
• 3'-T-Überhänge für die direkte Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten
• T7 und Sp6 Promoter zur In-vitro-RNA-Transkription und -Sequenzierung
• Ein vielseitiger Polylinker mit flankierenden EcoR I-Stellen für eine einfache Exzision von Inserts
• M13 Vorwärts- und Rückwärts-Primerstellen für die Sequenzierung

Funktionsweise von TA Cloning™
Taq-Polymerase hat eine nicht Template-abhängige Aktivität, die ein Einzel-Desoxyadenosin (A) an den 3'-Enden von PCR-Produkten einfügt. Der linearisierte Vektor in diesem Kit weist am 3‘-Ende Desoxythymidin (T)-Überhänge auf. Auf diese Weise können PCR-Inserts effizient mit dem Vektor ligiert werden.

Kit-Konfigurationen
Das TA Cloning™ Kit ist in einer Vielzahl von Konfigurationen erhältlich: mit One Shot™ INVF‘ chemisch kompetentem E. Coli (K2050-01 und K2050-40), One Shot™ TOP10F' chemisch kompetentem E. coli (K2060-01 und K2060-40) sowie ohne kompetente Zellen (K2750-20 und K2750-40) in Packungsgrößen mit 20 oder 40 Reaktionen.