SBFI, AM, cell permeant

SBFI ist ein natriumempfindliches Molekül, das zur Schätzung von Na⁺-Gradienten in isolierten Mitochondrien, zur Messung intrazellulärer NA⁺-Konzentrationen, zur Messung von Na⁺-EffLux in Zellen und in Kombination mit anderen Fluoreszenzindikatoren zur Korrelation von Veränderungen der intrazellulären Na⁺ mit Ca²⁺- und Mg²⁺-Konzentrationen, dem intrazellulären pH-Wert und dem Membranpotenzial verwendet werden. Obwohl die Selektivität von SBFI für Na⁺ geringer ist als die von Calciumindikatoren wie Fura-2, reicht sie für den Nachweis physiologischer Konzentrationen von Na⁺ in Gegenwart anderer monovalenter Kationen aus. Die spektrale Reaktion von SBFI bei Ionenbindung ermöglicht Messungen des Anregungsverhältnisses, dieser Indikator kann mit den gleichen optischen Filtern und Geräten verwendet werden, die für Fura-2 verwendet werden.

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Spezifikationen für Fluoreszenz-Ion-Indikatoren:
• Markierung (Ex/Em): SBFI (∼340, 380/500 nm)
• Gefriergetrocknetes Produkt kann zum Gebrauch in DMSO aufgelöst werden
• Produkt wird in der Regel in Zellen geladen, indem der gelöste Indikator dem Medium mit Zellen hinzugefügt wird

Selektivitätsüberlegungen und Strategien zum Einbringen in Zellen
Die Dissoziationskonstante (_Kd) von SBFI für Na⁺ beträgt 3,8 mM bei Abwesenheit von K⁺ und 11,3 mM bei Lösungen mit einer kombinierten Na⁺ und K⁺ Konzentration von 135 mM (was annähernd der physiologischen Ionenstärke entspricht). SBFI ist für Na⁺ um das ∼18-fache selektiver als für K⁺.

SBFI ist sowohl als zellundurchlässiges Säuresalz (S1262) als auch als membrangängiger Acetoxymethyl (AM)-Ester (S1263, S1264) erhältlich. Anionische Säureformen lassen sich mit unserem pinocytischen Zellinfusionsreagenz Influx™ (I14402, siehe Chelatoren, Kalibrierungspuffer, Ionophore und Zellinfusionsreagenzien—Abschnitt 19.8) oder durch Mikroinjektion, Patchpipetteninfusion oder Elektroporation in Zellen einbringen. Für das Einbringen über AM-Ester (Laden und Kalibrieren intrazellulärer Ionenindikatoren—Hinweis 19.1) ist typischerweise die Zugabe der Dispersionsmittel Pluronic™ F-127 (P3000MP, P6866, P6867) oder PowerLoad™ (P10020) sowie eine relativ lange Inkubationszeit—bis zu vier Stunden—erforderlich.

Fluoreszenzindikatoren für Na⁺ und K⁺ finden
Wir bieten eine Reihe an Fluoreszenzindikatoren zur Messung von Na⁺ und K⁺an. Weitere Informationen zu diesen Produkten finden Sie im Abschnitt Fluorescent Na+ and K+ Indicators—Section 21.1 im Molecular Probes™ Handbuch.

Für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke bei Menschen oder Tieren vorgesehen.