Microesferas magnéticas HisPur™ Ni-NTA

Las microesferas magnéticas de Ni-NTA Thermo Scientific HisPur son microesferas de alta capacidad de níquel-IMAC para la purificación por afinidad en los formatos manual y automático.

Características de las microesferas magnéticas de Ni-NTA Thermo Scientific HisPur:

• Alta capacidad: capacidad de unión equivalente o mayor que las microesferas magnéticas de Ni-NTA de otros proveedores
• Baja unión inespecífica: la superficie de las microesferas está prebloqueada y el protocolo proporciona tampones optimizados para la purificación
• Rápido: el protocolo se completa en 1 hora
• Ampliable: procesado de volúmenes de muestras desde microlitro a mililitro
• Versátil: purificación de proteínas en condiciones naturales o de desnaturalización
• Compatibilidad de reactivos: se puede utilizar con reactivos de lisis celular normales y gran variedad de aditivos de tampones
• Formatos múltiples: el acoplamiento de proteínas a las microesferas y las aplicaciones posteriores pueden realizarse tanto de forma manual como con una plataforma automática (p. ej., instrumentos Thermo Scientific KingFisher)

La superficie de las partículas magnéticas bloqueadas se derivatiza con el resto quelante del ácido nitrilotriacético (NTA) y se carga con iones de níquel divalentes (Ni²⁺). Las microesferas de cromatografía de afinidad de metales inmovilizados (IMAC) proporcionan una alta capacidad de unión con un entorno muy bajo. Las microesferas magnéticas de Ni-NTA HisPur se pueden utilizar de forma manual con un soporte magnético y con plataformas automáticas, como los instrumentos Thermo Scientific KingFisher, para conseguir un mayor rendimiento.

Las microesferas magnéticas de Ni-NTA HisPur se utilizan en la purificación por afinidad a pequeña escala, así como en la detección de elevado procesamiento de proteínas recombinantes marcadas con histidina. El marcador de polihistidina es el marcador de afinidad más conocido y se compone típicamente de seis residuos consecutivos de histidina (6 x His). Estas proteínas marcadas se sobreexpresan en diversos sistemas diferentes, más habitualmente en bacterias, y se purifican mediante lisados celulares tales como los obtenidos con los reactivos de extracción de proteínas bacterianas B-PER. La purificación de estas proteínas etiquetadas con His se consigue utilizando quelato de NTA cargado con níquel, que se coordina con las cadenas laterales de histidina. El quelato de NTA contiene cuatro lugares de unión de metal, lo que permite una lixiviación baja de iones metálicos y una elevada capacidad de unión. El protocolo de estas microesferas magnéticas HisPur Ni-NTA se ha optimizado para permitir una alta pureza de las proteínas aisladas marcadas con histidina. El rendimiento es igual o mayor al de las microesferas magnéticas Ni-NTA de otros proveedores.