Fluo-5F, AM, cell permeant - Special Packaging
Fluo-5F, AM, cell permeant - Special Packaging
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Fluo-5F, AM, cell permeant - Special Packaging

Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Fluo-5F, fluo-5NMás información
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Número de catálogoCantidad
F1422210 x 50 μg
Número de catálogo F14222
Precio (USD)
-
Cantidad:
10 x 50 μg
Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Fluo-5F, fluo-5N y fluo-4ff son análogos de fluo-4 con menor afinidad de unión de Ca2+, lo que los hace adecuados para detectar niveles intracelulares de calcio en el intervalo de 1 µM a 1 mM que saturarían la respuesta de fluo-3 y fluo-4. Las células se pueden cargar como éster AM de estos indicadores calcio mediante la adición del indicador disuelto directamente a las placas que contienen las células cultivadas. Estos indicadores son compatibles con la excitación a 488 nm mediante fuentes láser de iones de argón, lo que los hace útiles para aplicaciones de detección de microplacas, microscopía confocal y citometría de flujo.

Obtenga más información sobre los indicadores de iones, incluidos los indicadores de calcio, potasio, pH y potencial de membrana ›

Especificaciones del indicador de calcio (éster AM):
• Etiqueta (Ex/Em de forma unida a Ca2+): Fluo-5F (494/516 nm)
• Aumento de la intensidad de fluorescencia al unirse con Ca2+: >100 veces
• Kd para Ca2+ en tampón: ∼2,3 µM
• Presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+ con poco cambio en la longitud de onda

Uso de TPEN para controlar cationes de metales pesados
Además, los indicadores basados en BAPTA, como estos, se unen a varios cationes de metales pesados (por ejemplo, Mn2+, Zn2+, Pb2+) con mucha mayor afinidad que a Ca2+. Las perturbaciones en las mediciones de calcio causadas por la presencia de estos iones pueden controlarse usando el quelante seleccionador de metales pesados TPEN.

Más opciones para indicadores de calcio fluorescentes
Ofrecemos una amplia selección de indicadores de calcio Molecular Probes™ para su uso en diversos escenarios experimentales. Para obtener más información, consulte Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light—Section 19.3 (Indicadores de Ca2+ fluorescentes excitados mediante luz visible, sección 19.3) en el manual de Molecular Probes™.

Para obtener información sobre indicadores de Ca2+ excitables mediante UV, indicadores de Ca2+ basados en proteínas, conjugados de indicadores de Ca2+ e indicadores basados en fluorescencia de otros iones metálicos (es decir, Mg2+, Zn2+) consulte Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and Other Metal Ions—Chapter 19 (Indicadores para Ca2+, Mg2+, Zn2+ y otros iones metálicos, capítulo 19) en el manual de Molecular Probes™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteA base de colorantes fluorescentes
Cantidad10 x 50 μg
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Viabilidad y proliferación celulares
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, Microscopio de fluorescencia, Instrumentos de alto contenido, Lector HTS, Lector de microplacas, Generador de imágenes de fluorescencia
Tipo de productoIndicador de calcio
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Citations & References (20)

Citations & References
Abstract
A light-dependent increase in free Ca2+ concentration in the salamander rod outer segment.
Authors:Matthews HR, Fain GL
Journal:J Physiol
PubMed ID:11306652
'1. The Ca(2+) indicator dye fluo-5F was excited by an argon ion laser to measure changes in free Ca(2+) concentration ([Ca2+]i) in the outer segments of isolated salamander rods rapidly exposed to a 0 Ca(2+), 0 Na(+) solution designed to minimise surface membrane Ca(2+) fluxes. Over 30-60 s of laser ... More
Catheter lock solutions influence staphylococcal biofilm formation on abiotic surfaces.
Authors:Shanks RM, Sargent JL, Martinez RM, Graber ML, O'Toole GA,
Journal:Nephrol Dial Transplant
PubMed ID:16627606
'BACKGROUND: Microbial biofilms form on central venous catheters and may be associated with systemic infections as well as decreased dialysis efficiency due to catheter thrombosis. The most widely used anticoagulant catheter lock solution in the US is sodium heparin. We have previously shown that sodium heparin in clinically relevant concentrations ... More
Dopaminergic regulation of dendritic calcium: fast multisite calcium imaging.
Authors:Zhou WL, Oikonomou KD, Short SM, Antic SD,
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:23296782
'Optimal dopamine tone is required for the normal cortical function; however it is still unclear how cortical-dopamine-release affects information processing in individual cortical neurons. Thousands of glutamatergic inputs impinge onto elaborate dendritic trees of neocortical pyramidal neurons. In the process of ensuing synaptic integration (information processing), a variety of calcium ... More
The effect of light on outer segment calcium in salamander rods.
Authors:Matthews HR, Fain GL
Journal:J Physiol
PubMed ID:12949220
'Calcium acts as a second messenger in vertebrate rods, regulating the recovery phase of the light response and modulating sensitivity during light-adaptation. Since light not only decreases the outer segment calcium concentration ([Ca2+]i) by closing cyclic nucleotide-gated channels but can also increase [Ca2+]i by releasing Ca2+ from buffer sites or ... More
Imaging calcium entry sites and ribbon structures in two presynaptic cells.
Authors:Zenisek D, Davila V, Wan L, Almers W
Journal:J Neurosci
PubMed ID:12684438
'We investigated the location of calcium entry sites and synaptic ribbons in the type-Mb goldfish bipolar neuron and the bullfrog saccular hair cell. Cells were loaded with a fast calcium indicator (Fluo-3 or Fluo-5F) and an excess of a high-affinity but slow Ca buffer (EGTA). The cell surface was imaged ... More
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