Pierce™ Anti-c-Myc Agarose

La agarosa anti-c-Myc Thermo Scientific Pierce es una resina de inmunoprecipitación de alta afinidad ideal para la purificación de proteínas recombinantes etiquetadas con c-Myc expresadas en sistemas de expresión «in vitro» humanos y lisados de células bacterianas y de mamíferos.

Características de agarosa anti-c-Myc:

• Específico: anticuerpo monoclonal anti-c-Myc altamente específico (clon 9E10) que permite un alto rendimiento y una alta pureza para la inmunoprecipitación
• Escalable: disponible en tamaños de empaquetado de resina de 2 y 10 ml para permitir inmunoprecipitaciones o purificaciones a escala mayor
• Versátil: puede usarse en columnas de centrifugación o de gravedad, así como en cartuchos de FPLC
• Cómodo: reactivos para eluir y detectar proteínas de fusión etiquetadas con c-Myc disponibles por separado

El anticuerpo anti-c-Myc utilizado para fabricar la agarosa anti-c-Myc Pierce es un anticuerpo monoclonal IgG1 de ratón altamente específico (clon 9E10) que reconoce la etiqueta de epítopo c-Myc (EQKLISEEDL) derivada del oncogén c-myc humano (p62 c-myc). El soporte es la resina Superflow 6, una resina de agarosa altamente entrecruzada al 6 %. Esta resina de afinidad anti-c-Myc se puede envasar en columnas de purificación por gravedad, columnas de purificación por centrifugación o cartuchos para instrumentos de FPLC para purificar proteínas de fusión c-Myc expresadas en células bacterianas o de mamíferos.

Aplicaciones:
• Purificación de proteínas de fusión c-Myc expresadas en los kits de traslación «in vitro» humana Pierce
• Purificación a gran escala de proteínas etiquetadas con c-Myc recombinantes
• Enriquecimiento de alto rendimiento de proteínas de fusión y socios que interactúan
• Experimentos de IP y co-IP (como con el kit IP/co-IP de etiqueta c-Myc Pierce)

La agarosa anti-c-Myc Pierce consiste en un anticuerpo monoclonal anti-c-Myc altamente específico que se inmoviliza covalentemente en un soporte de agarosa con granulado al 6 % entrecruzada. El producto se suministra en forma de pulpa al 25 %. Tras la incubación con una muestra, la proteína de fusión etiquetada con c-Myc se captura en los gránulos de agarosa. Después de simples pasos de lavado, la proteína etiquetada se eluye fácilmente de la resina utilizando 0,1 M de glicina (pH 2,0-2,8), 3 M de NaSCN o 50 mM de NaOH dependiendo de la aplicación posterior de la proteína purificada. Para la elución de proteínas altamente funcionales, el péptido c-Myc Pierce también se puede utilizar para eluir la proteína etiquetada con c-Myc. El anticuerpo anti-c-Myc puede usarse para detectar la presencia de la proteína etiquetada por western blot.

En experimentos con una proteína de fusión etiquetada con c-Myc (26 a 29 kDa), la resina proporcionó una capacidad de unión de 102 a 144 nmol de proteína por ml de resina asentada. La capacidad de elución fue de al menos 18 a 19 nmol por ml de resina asentada usando 0,1 M de glicina, pH 2,8. La capacidad de unión y elución variará en función de la proteína de fusión c-Myc y el método de elución.

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