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Thermo Scientific™
L-Photo-Leucine
L-foto-leucina Thermo Scientific Pierce es un análogo de la L-leucina que se puede incorporar a las proteínas durante la síntesisMás información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| 22610 | 100 mg |
Número de catálogo 22610
Precio (CLP)
627.708
Each
Cantidad:
100 mg
Precio (CLP)
627.708
Each
L-foto-leucina Thermo Scientific Pierce es un análogo de la L-leucina que se puede incorporar a las proteínas durante la síntesis y, después, se activa con luz para entrecruzar covalentemente las proteínas que interactúan en las células.
Características de L-foto-leucina:
• Etiquetado in vivo: incropora un grupo fotorreactivo en proteínas utilizando la maquinaria celular normal de células vivas
• Entrecruzamiento in vivo: encuentra proteínas que interactúan en el entorno celular nativo
• Mayor especificidad: entrecruza correctamente proteínas que interactúan y están posicionadas en sus interfaces dentro de los dominios de interacción de proteínas
• Recuperación eficiente: recuperación del 90 % de las proteínas en lisados celulares tras el entrecruzamiento
• Compatible: entrecruza proteínas expresadas en una amplia variedad de líneas celulares, incluyendo HeLa, 293T, COS7, U2OS, A549, A431, HepG2, NIH 3T3 y C6
• Facilidad de uso: los reactivos son fotoestables bajo la iluminación normal de laboratorio, eliminando la necesidad de trabajar en la oscuridad
L-foto-leucina Thermo Scientific es un análogo de la L-leucina que se puede incorporar endógenamente en la secuencia primaria de proteínas durante la síntesis y, después, luz ultravioleta (UV) activada para entrecruzar covalentemente proteínas dentro de los dominios de interacción proteína a proteína en su entorno nativo dentro de las células vivas. Este potente método permite estudiar y caracterizar interacciones de proteínas estables y transitorias en células sin el uso de entrecruzadores químicos completamente extraños y disolventes de reactivos asociados durante el experimento de interacción, que pueden afectar adversamente a la biología celular que se estudia.
Cuando se combina su uso con medios limitantes especialmente formulados sin leucina, la maquinaria de síntesis de proteínas dentro de la célula trata al derivado fotoactivable como un aminoácido natural. Como resultado, se puede sustituir por la leucina en la secuencia primaria de proteínas durante el catabolismo y el crecimiento. Los derivados de la foto-leucina contienen anillos de diazirina que se activan cuando se exponen a la luz UV para convertirse en intermediarios reactivos que forman enlaces covalentes con las cadenas laterales de proteínas cercanas y cadenas principales. La asociación natural de los socios de unión dentro de la célula puede ser atrapada instantáneamente por la fotoactivación de las proteínas que contienen diazirina en las células cultivadas. Los complejos de proteínas entrecruzados pueden detectarse mediante una disminución de la movilidad en SDS-PAGE, además de detección de Western blot, cromatografía de exclusión por tamaños, gradiente de densidad de sacarosa o espectrometría de masas.
Recursos:
Preguntas frecuentes sobre el aminoácido fotorreactivo
Productos relacionados
L-foto-metionina
Medio de limitación Dulbecco con modificación de Eagle (DMEM/LM)
Características de L-foto-leucina:
• Etiquetado in vivo: incropora un grupo fotorreactivo en proteínas utilizando la maquinaria celular normal de células vivas
• Entrecruzamiento in vivo: encuentra proteínas que interactúan en el entorno celular nativo
• Mayor especificidad: entrecruza correctamente proteínas que interactúan y están posicionadas en sus interfaces dentro de los dominios de interacción de proteínas
• Recuperación eficiente: recuperación del 90 % de las proteínas en lisados celulares tras el entrecruzamiento
• Compatible: entrecruza proteínas expresadas en una amplia variedad de líneas celulares, incluyendo HeLa, 293T, COS7, U2OS, A549, A431, HepG2, NIH 3T3 y C6
• Facilidad de uso: los reactivos son fotoestables bajo la iluminación normal de laboratorio, eliminando la necesidad de trabajar en la oscuridad
L-foto-leucina Thermo Scientific es un análogo de la L-leucina que se puede incorporar endógenamente en la secuencia primaria de proteínas durante la síntesis y, después, luz ultravioleta (UV) activada para entrecruzar covalentemente proteínas dentro de los dominios de interacción proteína a proteína en su entorno nativo dentro de las células vivas. Este potente método permite estudiar y caracterizar interacciones de proteínas estables y transitorias en células sin el uso de entrecruzadores químicos completamente extraños y disolventes de reactivos asociados durante el experimento de interacción, que pueden afectar adversamente a la biología celular que se estudia.
Cuando se combina su uso con medios limitantes especialmente formulados sin leucina, la maquinaria de síntesis de proteínas dentro de la célula trata al derivado fotoactivable como un aminoácido natural. Como resultado, se puede sustituir por la leucina en la secuencia primaria de proteínas durante el catabolismo y el crecimiento. Los derivados de la foto-leucina contienen anillos de diazirina que se activan cuando se exponen a la luz UV para convertirse en intermediarios reactivos que forman enlaces covalentes con las cadenas laterales de proteínas cercanas y cadenas principales. La asociación natural de los socios de unión dentro de la célula puede ser atrapada instantáneamente por la fotoactivación de las proteínas que contienen diazirina en las células cultivadas. Los complejos de proteínas entrecruzados pueden detectarse mediante una disminución de la movilidad en SDS-PAGE, además de detección de Western blot, cromatografía de exclusión por tamaños, gradiente de densidad de sacarosa o espectrometría de masas.
Recursos:
Preguntas frecuentes sobre el aminoácido fotorreactivo
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L-foto-metionina
Medio de limitación Dulbecco con modificación de Eagle (DMEM/LM)
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Permeabilidad celularSí
DescripciónL-foto-leucina
FormularioSólido
Método de etiquetadoEtiquetado químico, etiquetado metabólico
Peso molecular143.15
PegiladoNo
Línea de productosPierce
Cantidad100 mg
Fracción reactivaDiazirina
Condiciones de envíoAmbiente
SolubilidadAgua
Longitud del brazo del separador0,0 Å
Soluble en aguaSí
Reactividad químicaNo selectivo-NA (etiquetado metabólico)
CleavableNo
Tipo de enlace cruzadoHeterobifuncionales
FormatoEstándar
Tipo de productoEntrecruzador
SeparadorCorto (< 10 Å)
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Tras su recepción, se debe almacenar a 4 °C, protegido de la luz.
Preguntas frecuentes
Apart from proteins, will the Photoreactive Amino Acids crosslink to other molecules?
How stable are the Photoreactive Amino Acids in DMEM-LM?
How long do I need to incubate the Photoreactive Amino Acids with my cells?
My cells will not grow in DMEM, what other type of culture media can be used with the Photoreactive Amino Acids?
Can I use the Photoreactive Amino Acids to crosslink peptides?
Citations & References (3)
Citations & References
Abstract
Mass spectrometry of laser-initiated carbene reactions for protein topographic analysis.
Journal:Anal Chem
PubMed ID:21425771
'We report a protein labeling method using nonselective carbene reactions of sufficiently high efficiency to permit detection by mass spectrometric methods. The approach uses a diazirine-modified amino acid (l-2-amino-4,4''-azipentanoic acid, "photoleucine") as a label source, which is converted to a highly reactive carbene by pulsed laser photolysis at 355 nm.
The copper binding domain of SPARC mediates cell survival in vitro via interaction with integrin beta1 and activation of integrin-linked kinase.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:18503049
'Secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) is important for the normal growth and maintenance of the murine lens. SPARC-null animals develop cataracts associated with a derangement of the lens capsule basement membrane and alterations in lens fiber morphology. Cellular stress and disregulation of apoptotic pathways within lens epithelial
Inhibition of calcineurin-mediated endocytosis and alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid (AMPA) receptors prevents amyloid beta oligomer-induced synaptic disruption.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:20032460
Synaptic degeneration, including impairment of synaptic plasticity and loss of synapses, is an important feature of Alzheimer disease pathogenesis. Increasing evidence suggests that these degenerative synaptic changes are associated with an accumulation of soluble oligomeric assemblies of amyloid beta (Abeta) known as ADDLs. In primary hippocampal cultures ADDLs bind to