La tinción en vivo de fosfatasa alcalina es un producto de adquisición de imágenes de células madre que permite aMás información
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Número de catálogo
Cantidad
A14353
1 tubo
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Precio (CLP)
452.454
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La tinción en vivo de fosfatasa alcalina es un producto de adquisición de imágenes de células madre que permite a los usuarios teñir de manera diferencial las células madre pluripotentes (PSC). El tinte es un sustrato fluorescente que penetra en las células para la fosfatasa alcalina (AP) que no es tóxico para las células y se difunde a lo largo de dos horas. La tinción en vivo de fosfatasa alcalina consta de 50 µl de un colorante a base de fluoresceína 500X en DMSO, suficiente para teñir dos placas de 24 pocillos, cuatro placas de 6 cm o dos placas de 10 cm.
Esta tinción en vivo de fosfatasa alcalina le permite:
• Identificar células madre pluripotentes con una señal fuerte sobre el fondo • Teñir las PSC normalmente en 20 minutos o menos • Utilizar la primera tinción de fosfatasa alcalina comercializada que mantiene la viabilidad celular
Método de detección de células madre pluripotentes de fosfatasa alcalina AP es un marcador fenotípico de las PSC, incluidas las células madre embrionarias no diferenciadas (PSC), las células madre pluripotentes inducidas (iPSC) y las células germinales embrionarias (EGC). Mientras que el AP se expresa en la mayoría de los tipos de células, su expresión es muy elevada en las PSC. Por lo tanto, la tinción de AP se ha utilizado para teñir de manera diferencial las PSC para distinguirlas fácilmente de los fibroblastos embrionarios de ratón (MEF) utilizados como alimentadores y fibroblastos parentales comúnmente utilizados en experimentos de reprogramación.
Detección de pluripotencia sin sacrificar colonias valiosas La tinción viva de fosfatasa alcalina es ideal para la detección de colonias durante las primeras etapas del flujo de trabajo de reprogramación, ya que la tinción mantiene la viabilidad de las células madre. También se puede utilizar en etapas posteriores como una herramienta de selección negativa para identificar células sin diferenciar.
Tinción rápida de células La tinción viva de fosfatasa alcalina utiliza un protocolo fácil, no permanente y viable para las células para identificar las PSC en sus experimentos. Simplemente diluya el tinte en el medio, aplique a las células, lave suavemente, y las células estarán listas para la adquisición de imágenes fluorescente.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de célulaCélulas madre (iPS - célula madre pluripotente inducido), células madre (embrionarias)
Tipo de sustratoSubstrato de AP (fosfatasa alcalina)
ColorVerde
Para utilizar con (aplicación)Ensayo de viabilidad
Para utilizar con (equipo)Sistema de adquisición de imágenes de células Floid™, Microscopio de fluorescencia
Tipo de productoTinción en vivo de fosfatasa alcalina
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene un vial ámbar. Almacenar a -20 °C.
Preguntas frecuentes
How can I prevent poor or dim staining when using Alkaline Phosphatase Live Stain?
Serum or serum replacement components in the growth medium may cause background and this can result in poor or dim staining. After the removal of the growth medium, gently wash the culture with pre-warmed DMEM/F-12 (Cat. No. 10565-018) for 5 minutes. Aspirate and repeat once before adding the AP Live Stain. To further decrease background staining, perform 3 separate washes of 5 minutes each with DMEM/F-12 for a total of 15 minutes following the staining, and visualize immediately.
How should Alkaline Phosphatase Live Stain be stored?
Store AP Live Stain at -20 degrees C in the freezer and thaw at room temperature. Avoid repeated freeze/thaw cycles and aliquot the AP Live Stain into smaller volumes if necessary. Always protect from light and avoid extended exposure at room temperature and atmospheric conditions.
Can I use Alkaline Phosphatase Live Stain in my reprogramming experiments?
AP Live Stain is ideal for screening colonies during early stages of reprogramming since it selectively stains PSCs while maintaining cell viability. It can be used in later stages of reprogramming to identify undifferentiated cells for the selection of iPSCs for further cultivation. AP Live Stain was developed specifically for use on live cultures for cell maintenance and is qualified to be free of mycoplasma and bioburden, and exhibits extremely low endotoxin levels.
How long should I wait before using Alkaline Phosphatase Live stain on my cells again?
Colonies may be restained as early as 24 hours after the initial staining. It is recommended that cells are allowed to recover properly to obtain consistent results.
Novel Live Alkaline Phosphatase Substrate for Identification of Pluripotent Stem Cells.
Authors:Singh U, Quintanilla RH, Grecian S, Gee KR, Rao MS, Lakshmipathy U,
Journal:Stem Cell Rev
PubMed ID:22426885
Characterization of pluripotent stem cells.
Authors:Martí M, Mulero L, Pardo C, Morera C, Carrió M, Laricchia-Robbio L, Esteban CR, Izpisua Belmonte JC,
Journal:Nat Protoc
PubMed ID:23306458
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Immune Defense Protein Expression in Highly Purified Mouse Lung Epithelial Cells.
Authors:Sinha M, Lowell CA
Journal:Am J Respir Cell Mol Biol
PubMed ID:26574781
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