Kit de potencial de membrana FluoVolt™
Kit de potencial de membrana FluoVolt™
Invitrogen™

Kit de potencial de membrana FluoVolt™

El kit de potencial de membrana FluoVolt™ representa la próxima generación en kits basados en sondas fluorescentes sensibles a laMás información
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Número de catálogoCantidad
F104881 kit
Número de catálogo F10488
Precio (CLP)
877.417
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Cantidad:
1 kit
Precio (CLP)
877.417
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El kit de potencial de membrana FluoVolt™ representa la próxima generación en kits basados en sondas fluorescentes sensibles a la tensión. La sonda FluoVolt™ reúne las mejores características de las sondas fluorescentes potenciales de membrana de respuesta rápida y lenta. La sonda FluoVolt™ responde a los cambios en el potencial de la membrana en menos de milisegundos y muestra una alta magnitud de respuesta.

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Entre las características de la sonda de potencial de membrana FluoVolt™ se incluyen:

• Rapidez: responde a los cambios en el potencial de membrana en menos de milisegundos
• Alta sensibilidad: el rango de respuesta es típicamente del 25 % por 100 mV
• La emisión/excitación funciona con los ajustes de FITC estándar
• Se puede utilizar en aplicaciones de imágenes o fijación de parches

Los cambios en el potencial de la membrana desempeñan un papel central en muchos procesos fisiológicos, incluyendo la propagación del impulso nervioso, la contracción muscular y la señalización celular. Las sondas fluorescentes potenciométricas son herramientas importantes para el estudio de estos procesos y generalmente se caracterizan como sondas de respuesta lenta o rápida.

Las mejores características de las sondas de respuesta lenta y rápida
Las sondas de respuesta lenta funcionan ingresando células despolarizadas, uniéndose a proteínas o membranas y exhibiendo fluorescencia mejorada. Este evento de translocación de membrana disminuye la capacidad de estos indicadores para responder a los cambios en el potencial de membrana e introduce una carga capacitiva que puede afectar la salud celular. Sin embargo, estas sondas muestran una alta magnitud de respuesta; normalmente en el rango de 1 % por mV.

Las sondas de respuesta rápida son moléculas que cambian su estructura en respuesta al campo eléctrico circundante y detectan cambios potenciales transitorios (milisegundo). Sin embargo, en comparación con las sondas de respuesta lenta, las sondas de respuesta rápida tienen una magnitud de cambio de fluorescencia dependiente del potencial que suele ser pequeño (2–10 % de cambio de fluorescencia por 100 mV).

La sonda de potencial de membrana FluoVolt™ muestra las mejores propiedades de las sondas de respuesta lenta y rápida. La sonda FluoVolt™ es una sonda de respuesta rápida con una respuesta de fluorescencia superior dependiente del potencial. La respuesta es lo suficientemente rápida para detectar cambios potenciales transitorios (submilisegundos) en células excitables y genera un cambio de señal superior al 25 % por 100 mV.

Soluciones de supresor de fondo y PowerLoad™ también incluidas
Para facilitar la carga celular, el Kit de potencial de la membrana FluoVolt™ concentrado PowerLoad™. Debido a la naturaleza única de la solución PowerLoad™, se puede utilizar en presencia de medios de cultivo completos, reduciendo así los efectos negativos de sustituir medios o cargarlos en medios sin suero.

La autofluorescencia de línea base causada por componentes dentro de los medios de crecimiento se puede reducir en gran medida mediante la adición del supresor de fondo neurológico incluido. Esta solución se ha formulado específicamente para su uso con células neuronales y no causará shock osmótico. Además, el supresor de fondo neurológico se ha utilizado con éxito con muchos tipos de células diferentes para suprimir eficazmente la fluorescencia de fondo sin sacrificar la fluorescencia celular específica generada en el ensayo.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Cantidad1 kit
Localización subcelularMembranas celulares & lípidos
Línea de productosMolecular Probes
Tipo de productotinción, colorante, teñir…
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene:
  • 50 μl de colorante FluoVolt™
  • 500 μl de concentrado PowerLoad™
  • 5 ml de supresor de fondo neurológico
  • Almacenar entre 2 °C y 8 °C
  • No los congele
  • Preguntas frecuentes

    I am seeing high background outside of my neuronal cells when using membrane potential indicators. What can I do to reduce background?

    If you use our FluoVolt Membrane Potential Kit (Cat. No. F10488), the kit provides a background suppressor to reduce this problem. For other indicators, consider the use of BackDrop Background Suppressor (Cat no. R37603, B10511, and B10512).

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    Why do I lose all signal from my neuronal tracer when I do a methanol fixation on my cells?

    If the tracer you chose is a lipophilic dye and fix with methanol, the lipids are lost with the methanol. If you have to use methanol fixation then choose a tracer that will covalently bind to proteins in the neurons.

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    I stained my cells with a lipophilic cyanine dye, like DiI, but the signal was lost when I tried to follow up with antibody labeling. Why?

    Since these dyes insert into lipid membranes, any disruption of the membranes leads to loss of the dye. This includes permeabilization with detergents like Triton X-100 or organic solvents like methanol. Permeabilization is necessary for intracellular antibody labeling, leading to loss of the dye. Instead, a reactive dye such as CFDA SE should be used to allow for covalent attachment to cellular components, thus providing for better retention upon fixation and permeabilization.

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    I labeled my neurons with DiI and then fixed and permeabilized and now I have no signal. What did I do wrong?

    DiI is a lipophilic dye that resides mostly in lipids in the cell, when cells are permeabilized with detergent or fixed using alcohol this strips away the lipid and the dye. If permeabilization is required CM-DiI can be used because this binds covalently to proteins in the membrane; some signal is lost upon fixation/permeabilization, but enough signal should be retained to make detection possible.

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    What is the difference between fast and slow-response membrane potential probes?

    Molecules that change their structure in response to the surrounding electric field can function as fast-response probes for the detection of transient (millisecond) potential changes. Slow-response dyes function by entering depolarized cells and binding to proteins or membranes. Increased depolarization results in additional dye influx and an increase in fluorescence, while hyperpolarization is indicated by a decrease in fluorescence. Fast-response probes are commonly used to image electrical activity from intact heart tissues or measure membrane potential changes in response to pharmacological stimuli. Slow-responding probes are often used to explore mitochondrial function and cell viability.

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    Citations & References (12)

    Citations & References
    Abstract
    Screening fluorescent voltage indicators with spontaneously spiking HEK cells.
    Authors:Park J, Werley CA, Venkatachalam V, Kralj JM, Dib-Hajj SD, Waxman SG, Cohen AE,
    Journal:
    PubMed ID:24391999
    Development of improved fluorescent voltage indicators is a key challenge in neuroscience, but progress has been hampered by the low throughput of patch-clamp characterization. We introduce a line of non-fluorescent HEK cells that stably express NaV 1.3 and KIR 2.1 and generate spontaneous electrical action potentials. These cells enable rapid, ... More
    Electrophysiology of hiPSC-Cardiomyocytes Co-Cultured with HEK Cells Expressing the Inward Rectifier Channel.
    Authors:
    Journal:Int J Mol Sci
    PubMed ID:34205607
    Patient-specific, re-engineered cardiomyocyte model confirms the circumstance-dependent arrhythmia risk associated with the African-specific common SCN5A polymorphism p.S1103Y: Implications for the increased sudden deaths observed in black individuals during the COVID-19 pandemic.
    Authors:
    Journal:Heart Rhythm
    PubMed ID:34979239
    hiPSC-CM Monolayer Maturation State Determines Drug Responsiveness in High Throughput Pro-Arrhythmia Screen.
    Authors:
    Journal:Sci Rep
    PubMed ID:29061979
    High-Throughput Drug Screening System Based on Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Atrial Myocytes ∼ A Novel Platform to Detect Cardiac Toxicity for Atrial Arrhythmias.
    Authors:
    Journal:Front Pharmacol
    PubMed ID:34413773