El kit de purificación de centrifugado Ni-NTA Thermo Scientific HisPur contiene columnas de centrifugación Ni-NTA HisPur de 0,2 ml, así como tampones necesarios para purificar proteínas marcadas con polihistidina. La resina de Ni-NTA HisPur es una resina IMAC de níquel de alto rendimiento y alta capacidad para las rutinas de purificación por afinidad de proteínas de fusión marcadas con His.

Características de la resina Ni-NTA HisPur:

• Alta capacidad: unión de hasta 60 mg de proteínas marcadas con 6xHis por ml de resina
• Versátil: purificación de proteínas en condiciones naturales o de desnaturalización
• Compatible: se utiliza con reactivos de lisis celular Thermo Scientific y una gran variedad de aditivos de tampón
• Rentable: vuelva a utilizar el mismo lote de resina al menos cinco veces
• Fácil de usar: tampones preformulados disponibles para formatos de kit
• Flexible: disponible en varios formatos, incluida resina a granel, columnas de centrifugación, cartuchos de cromatografía y placas de filtro de 96 pocillos

El soporte de níquel-NTA especialmente preparado consta de agarosa granulada derivatizada con la mitad de quelantes del ácido nitrilotriacético (NTA) y cargada con iones de níquel divalentes (Ni²⁺). La resina de cromatografía de afinidad de metal inmovilizado (IMAC) proporciona una capacidad de unión y un rendimiento excepcionales para la purificación de proteínas recombinantes marcadas con His.

La expresión y purificación de proteínas recombinantes es un factor central para estudiar la regulación, estructura y funciones de las proteínas. La mayoría de proteínas recombinantes se expresan como fusiones con etiquetas de afinidad cortos, siendo la polihistidina (6xHis) la etiqueta más popular. El método utilizado para purificar las proteínas recombinantes marcadas con His es la cromatografía de afinidad de metal inmovilizado (IMAC), compuesta por resinas quelantes marcadas con iones de níquel o cobalto que se coordinan con las cadenas laterales de la histidina.

La resina de Ni-NTA HisPur purifica altos niveles de proteínas de fusión marcadas con His sobreexpresadas a partir de lisados bacterianos, por ejemplo, los obtenidos con los reactivos de extracción de proteínas bacterianas Thermo Scientific B-PER. La resina rinde bien en los procedimientos de unión por lotes y de columnas de centrifugación a diversas escalas. El rendimiento es igual o superior al que se obtiene con las resinas Ni-NTA populares de otros proveedores. La resina de Ni-NTA HisPur es un soporte de afinidad estable, de alta calidad y resistente. Las pruebas confirman la ausencia de reducciones en el rendimiento después de cinco ciclos de uso repetidos. Estos datos indican que la resina es altamente resistente a la degradación estructural o a los escapes de iones de níquel durante el uso normal.

La resina de Ni-NTA HisPur y la resina de cobalto HisPur son formatos alternativos de IMAC, en los que el primero utiliza níquel y el segundo cobalto, como el ion de quelato de metal responsable de la unión de proteínas marcadas con His. Las resinas de Ni-NTA son la elección de resina IMAC más frecuente para purificaciones de proteínas marcadas con 6xHis debido a sus cuatro sitios de unión con metales del quelato, que permite una unión de proteínas alta y un escape de iones metálicos bajo. El cobalto se une con menos fuerza y, por lo tanto, más discriminadamente, permitiendo un grado de pureza más alto pero, por lo general, con un rendimiento menor en cuanto a la purificación de proteínas con marcaje His.

Formatos disponibles:
• Mezclas de resina: agarosa granulada al 6 % entrecruzada; frascos de 10 ml, 100 ml y 500 ml
• Columnas de centrifugación: 0,2 ml (microcentrífuga), columnas de 1 ml y 3 ml
• Kits de purificación: kits completos en los tres tamaños de columna
• Cartuchos de cromatografía: obtenga más información y consulte los datos de los cartuchos de cromatografía HisPur
• Placas de centrifugación de 96 pocillos

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