Phospha-Light™ SEAP Reporter Gene Assay System

El sistema de ensayo Phospha-Light™ es un ensayo de gen indicador quimioluminiscente para la detección sensible de fosfatasa alcalina de placenta humana secretada utilizada como proteína indicadora.

• La detección del indicador secretado permite el análisis sin destruir células valiosas.
• El amplio rango dinámico del ensayo con fosfatasa alcalina permite al usuario medir el nivel de enzima con exactitud en el rango de femtogramos a nanogramos.
• La sensibilidad del ensayo es de 100 a 1000 veces mejor que los ensayos isotópicos⁄no isotópicos para cloranfenicol acetil transferasa (CAT) o los ensayos colorimétricos⁄fluorescentes para -galactosidasa, lo que proporciona una mayor sensibilidad que los ensayo de la competencia.
• El ensayo de alta sensibilidad con un amplio rango dinámico permite la detección de niveles altos y bajos de indicador sin necesidad de realizar numerosas diluciones de la muestra.
• El kit de ensayo con gen indicador no radioactivo elimina las preocupaciones por el uso de radioisótopos.
• El ensayo se puede completar en aproximadamente una hora, lo que proporciona una respuesta rápida del ensayo.

Supervisión de la expresión a lo largo del tiempo
El sistema de ensayo Phospha-Light™ permite la detección sensible de la proteína indicadora fosfatasa alcalina (SEAP) secretada en los medios de cultivo celular. El producto del gen SEAP es una forma truncada de fosfatasa alcalina placentaria humana. La secreción de la proteína indicadora elimina la necesidad de preparar extractos celulares. La población de células se puede supervisar a lo largo del tiempo y permanece intacta para otros experimentos.

Reactivos exclusivos para una detección ultrasensible
El sistema de ensayo Phospha-Light™ es uno de los métodos más fáciles y rápidos para optimizar la eficacia de la transfección. Una combinación de reactivos exclusivos es la clave para la detección altamente sensible que se puede lograr con el ensayo Phospha-Light™. El sistema consta del sustrato de la fosfatasa alcalina de alto rendimiento CSPD™, el potenciador de luminiscencia Emerald™ y un sistema de tampón único diseñado específicamente para inhibir la actividad de la fosfatasa alcalina no placentaria endógena. El brillo persistente de la señal quimioluminiscente permite el uso de luminómetros sin necesidad de inyectores para la medición.

Aplicaciones
El sistema de ensayos con gen indicador Phospha-Light™ se ha utilizado ampliamente para ensayos con gen indicador para medir la expresión génica en líneas celulares establecidas y en células primarias transfectadas, incluso como lectura de silenciamiento génico⁄interferencia por ARN. El ensayo con gen indicador Phospha-Light se ha utilizado en una amplia variedad de ensayos funcionales víricos, incluyendo ensayos de expresión de genes virales, replicación viral, fusogenicidad viral, neutralización de virus y fusión celular mediada por virus e infectividad vírica. El uso de la proteína indicadora SEAP es muy útil para los ensayos in vivo con gen indicador, analizando muestras de suero de animales transgénicos, transfectados o infectados por vectores virales. Se ha utilizado el sistema de ensayo con gen indicador Phospha-Light para medir los niveles de SEAP en sueros de animales completos transgénicos o transfectados, incluidos sueros de ratón, rata, tití, mono y cerdo, así como en líquido alantoico de huevo de gallina. La proteína SEAP de ratón (mSEAP) se ha desarrollado recientemente para mejorar la estabilidad de la proteína SEAP en ratones transgénicos, y se ha utilizado el sistema Phospha-Light™ para la detección sensible de mSEAP. Para estas y otras referencias, consulte nuestra bibliografía en la sección de Documentación⁄Sección de Recursos.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.