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Invitrogen™

CellsDirect™ One-Step qRT-PCR Kit with ROX, for ABI 7000, 7300, 7700, and 7900(HT) instruments

Le kit RT-qPCR en une étape CellsDirect™ fournit des résultats de qPCR en temps réel extrêmement sensibles et spécifiques, directementAfficher plus
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RéférenceNbre de réactions
11754500500 réactions
11754100100 réactions
Référence 11754500
Prix (EUR)
4 435,00
Each
Nbre de réactions:
500 réactions
Prix (EUR)
4 435,00
Each
Le kit RT-qPCR en une étape CellsDirect™ fournit des résultats de qPCR en temps réel extrêmement sensibles et spécifiques, directement à partir des cellules, sans nécessiter d’étape de purification de l’ARN.

Caractéristiques du kit RT-qPCR en une étape CellsDirect™ :

Efficacité : gagnez du temps et de l’argent avec un débit augmenté
Pratique : mélange enzymatique qui comprend la transcriptase inverse SuperScript™ III et l’ADN polymérase Platinum™ Taq
Sensibilité : pas d’étape d’isolement de l’ARN séparé, ce qui augmente la sensibilité en minimisant la perte d’échantillons
Large plage de détection : détection des cibles dans des échantillons comprenant entre une et 10 000 cellules
Polyvalence : compatibilité avec une grande variété de lignées cellulaires et d’échantillons prélevés par microdissection par capture laser (LCM)

Flux de travail simplifié
Dans la PCR quantitative en temps réel (RT-qPCR) classique, vous devez d’abord isoler l’ARN des cellules en effectuant une procédure chronophage pouvant entraîner une perte de matériau. Le kit CellsDirect™ One-Step RT-qPCR vous permet de lyser les cellules et d’ajouter le lysat complet directement à une réaction RT-qPCR en une étape avec un minimum de manipulation et de perte d’échantillons.

Idéal pour les applications de RT-qPCR
La technologie CellsDirect™ est validée pour les études d’expression génétique impliquant des échantillons limités et permet de valider l’extinction de l’ARNi. Les kits de RT-qPCR en une étape CellsDirect™ sont particulièrement précieux dans les applications à haut débit, car ils éliminent les étapes de purification d’ARN coûteuses et chronophages (figure 1). Le kit RT-qPCR en une étape CellsDirect™ peut également être utilisé pour détecter des cibles d’ADN génomiques.

Les kits de RT-qPCR en une étape CellsDirect™ peuvent être utilisés conjointement avec des sondes d’hydrolyse (par exemple, les amorces fluorogéniques TaqMan™ ou LUX™).

Remarque : Ce kit comprend du Reaction Mix 2X contenant un colorant de référence ROX™. Un kit équivalent (11753-500), contenant un tube séparé de colorant de référence ROX™ est également disponible.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (équipement)7000 System, 7300 System, 7700 System, 7900HT Fast System, 7900HT System, Eppendorf™ MasterCycler™ RealPlex, QuantStudio 3 and 5 systems, QuantStudio 6 and 7 Pro systems, QuantStudio 7 Flex system, QuantStudio 12k Flex system, QuantStudio 6 Flex system
Nbre de réactions500 réactions
Gamme de produitsCellsDirect, Platinum, SuperScript
Quantité500 réactions
Type d’échantillonCellules
Concentration2X
Méthode de détectionAmorce-sonde
À utiliser avec (application)PCR en temps réel
Vitesse de réactionRapide ou standard
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• Tampon de resuspension, 10 ml
• Activateur de lyse, 1 ml
• 1 U/µl de DNase I, qualité amplification, 2 x 1,25 ml
• Tampon de DNase I 10X, 800 µl
• EDTA 25 mM, 2 x 1 ml
• Mélange RT SuperScript™ III / Platinum™ Taq, 500 µl
• Reaction Mix avec ROX™ 2X, 12,5 ml
• MgSO4 50 mM, 1 ml
• Eau traitée par DEPC, 12,5 ml
• 10 ng/µl d’ARN total HeLa, 10 µl

Le kit est expédié sur glace sèche et doit être stocké à -20°C.

Foire aux questions (FAQ)

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.