SuperScript™ VILO™ Master Mix
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SuperScript™ VILO™ Master Mix

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Le mélange SuperScript VILO Master Mix est un mélange maître de synthèse d’ADNc premier brin pour les applications RT-qPCR en deux étapes. Le Master Mix associe la transcriptase inverse (RT) SuperScript III et d’autres composants de réaction RT dans un format à tube unique pour permettre une synthèse fiable premier brin et des rendements élevés d’ADNc à partir d’une large gamme de concentrations d’ARN introduit. L’efficacité de la RT élevée de la RT SuperScript III et la formulation optimisée permettent au Master Mix d’offrir une linéarité élevée dans la synthèse d’ADNc sur une large gamme de modèles d’ARN introduit pour les dosages quantitatifs en deux étapes de RT-PCR (qRT-PCR).

Remarque : Pour des performances de synthèse d’ADNc supérieures dans les applications de RT-qPCR, nous recommandons le mélange SuperScript IV VILO Master Mix ou le mélange SuperScript IV VILO Master Mix with ezDNase Enzyme. Le mélange SuperScript IV VILO Master Mix propulse la technologie VILO éprouvée au niveau supérieur avec la RT SuperScript IV hautement processive et thermostable et le tampon optimisé. Le Master Mix permet une synthèse efficace de l’ADNc à des températures plus élevées en moins de temps et offre un rendement et une sensibilité supérieurs de l’ADNc, même avec une pureté sous-optimale ou des modèles rares.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de produit finalADNc premier brin
FormatTube
Nbre de réactions50 réactions
Température de réaction optimale42°C
Quantité50 réactions
Format de réactionMaster Mix
Type de réactifTranscription inverse
Transcriptase inverseSuperScript III
Activité de la ribonucléase HRéduction
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Taille (produit final)Jusqu’à 10 kb
Matériau de départARN
TechniqueTranscription inverse
Concentration5X
Méthode de détectionqPCR
À utiliser avec (application)PCR en temps réel
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réaction60 min
Unit SizeEach
Contenu et stockage

• Master Mix SuperScript VILO (200 μl)

Conserver entre –30°C et –5°C.

Foire aux questions (FAQ)

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

What is the difference between SuperScript III RT and the RT in the SuperScript VILO kit?

The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript

The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11754050) contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript VILO kit is active at 42 degrees C due to the helper proteins.

How much of the first-strand cDNA reaction should I load for PCR?

While the volume is dependent on the starting amount of RNA used for the first-strand synthesis and the abundance of the target gene, we'd recommend starting with 10% of the first-strand reaction for your PCR reaction.

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Citations et références
Abstract
Hypothalamic distribution of somatostatin mRNA expressing neurones relative to pubertal and adult changes in pulsatile growth hormone secretion in mice.
Authors:Tan HY, Huang L, Simmons D, Veldhuis JD, Steyn FJ, Chen C
Journal:
PubMed ID:23855876
'The age-associated decline in growth hormone (GH) secretion may be a consequence of the reduction in the number of GH-releasing hormone (GHRH) positive neurones. However, it remains unclear whether an alteration in the number or distribution of somatostatin (SST) neurones contributes to this change. In the present study, we characterised ... More