Le kit de purification d’ADN ⁄ ARN viral PureLink™ Pro 96 est le seul système de plaques de silice à 96 puits pouvant extraire l’ARN et l’ADN viral à partir de liquides exempts de cellules de 200 µl et utilisant une nacelle peu profonde 96 puits pour centrifugeuse pour une facilité d’utilisation, sans aucune perte de sensibilité. Ces kits fournissent ce qui suit :
• Polyvalence : un kit pour tous vos échantillons, le protocole est optimisé pour l’extraction de l’ARN et de l’ADN viraux
• Flexibilité dans le choix des centrifugeuses : vitesses minimales pour un traitement de 96 puits de 2 250 x g et une profondeur de godet de rotor de 5 cm font de ce kit l’un des systèmes les plus adaptables pour les centrifugeuses de laboratoire existantes (Figure 1)
• Sensibilité et reproductibilité aussi bonnes qu’une colonne de centrifugation : passer au haut débit est fiable et facile sans perte précision de la quantification

Le kit de purification d’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ Pro 96 est basé sur la chimie d’extraction classique des plaques de silice. Les échantillons exempts de cellules sont lysés dans des tampons contenant de la guanidine qui ont été reformulés pour augmenter la récupération et la sensibilité des acides nucléiques purifiés, tandis que l’ARN porteur est utilisé pour protéger les échantillons de la dégradation de la RNase. La liaison des lysats à la plaque de filtrage virale peut être effectuée avec un collecteur à vide ou une centrifugation à l’aide d’un rotor à 96 puits avec godets d’une profondeur de seulement 5 cm. Après lavages avec des tampons à base d’éthanol, l’ARN ou l’ADN viral est élué dans 100 µl d’eau exempte de RNase. L’ARN ou l’ADN est prêt à être utilisé avec des RT-PCR et qRT-PCR, des qPCR ou d’autres procédures d’amplification enzymatique en une ou deux étapes.

Le kit de purification d’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ Pro 96 montre une excellente homogénéité de puits à puits
Une des exigences essentielles pour tout système de purification à 96 puits est l’homogénéité de puits à puits. Lors de l’utilisation d’une technique aussi sensible que la qRT-PCR pour la détection d’acide nucléique viral (qui peut exister en tant que faibles titres viraux dans les échantillons de patients) l’homogénéité entre les échantillons devient encore plus importante. Lorsque la récupération de l’ARN lentiviral de puits à puits a été analysée à l’aide du kit de purification de l’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ Pro 96, des valeurs de Ct homogènes ont été obtenues dans les analyses qRT-PCR alors que les contrôles du plasma effectués sur la même plaque étaient négatifs, ne montrant aucune contamination croisée (Figure 2).

Obtenez les mêmes résultats avec une extraction de plaques à 96 puits qu’avec une colonne de centrifugation
Pour prouver l’homogénéité de notre nouvelle chimie de purification dans les formats à faible et haut débit, le virus du VHC Armored RNA™ a été injecté dans du plasma humain et 200 µl ont été utilisés pour la purification des acides nucléiques viraux avec le mini-kit d’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ (purification par colonne de centrifugation) ou avec le kit de purification d’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ Pro 96. Les échantillons purifiés ont été analysés pour une comparaison des performances à l’aide de la qRT-PCR. Les deux méthodes de purification ont démontré avec succès la purification et la détection virales, car les deux profils de purification présentent des profils d’analyse de détection qRT-PCR évolutifs (Figure 3). Le kit de purification d’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ Pro 96 offre une purification d’ARN ⁄ ADN viral linéaire sensible et évolutive, avec une sensibilité et une efficacité égales à celles du format de purification par colonnes de centrifugation.

Conception améliorée des plaques
Le kit de purification d’ARN ⁄ ADN viral Purelink™ Pro offre des plaques à demi-jupe à 96 puits (Figure 4) optimisées pour des performances et des résultats améliorés. En outre, les buses de plaque avec col annulaire empêchent la contamination croisée des échantillons et améliorent le séchage de la membrane de silice pour empêcher le transfert d’éthanol. De plus, le traitement des échantillons peut être effectué manuellement à l’aide d’un collecteur à vide de paillasse, par centrifugation (a 2 250 x g) ou avec une plateforme automatisée de manipulation des liquides. La structure des plaques à demi-jupe est compatible avec la plupart des collecteurs de vide des stations de travail robotisées.