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L’ADN polymérase riche en GC AccuPrime™ est conçue pour fournir une amplification à haute spécificité et à haut rendement de modèles difficiles à amplifier, tels que ceux dont la teneur en GC est > 65 %. Le kit propose un choix de tampons pour amplifier les cibles d’ADN génomique (tampon A) ou l’ADNc pauvre en GC, le plasmide et les cibles lambda (tampon B). Avantages de l’utilisation de l’ADN polymérase riche en GC AccuPrime™ :
• Rendement : rendements élevés pour des cibles de longueur allant jusqu’à 5 kb • Spécificité : protéines accessoires AccuPrime™ pour une spécificité de PCR améliorée • Sensibilité : sensibilité réduite à 5 ng d’ADN modèle
Amplifications robustes et spécifiques Les tampons AccuPrime™ contiennent des protéines thermostables qui améliorent l’hybridation des modèles d’amorces pendant la PCR, ce qui augmente la spécificité de la réaction. La polymérase elle-même, provenant de l’archaebacterium Pyrolobus fumarius, a une processivité cinq fois supérieure à l’ADN polymérase Taq et reste active même après 4 heures à 95°C.
Définition de l’unité Une unité d’ADN polymérase riche en GC AccuPrime™ est la quantité d’enzymes nécessaire pour incorporer 10 nmol de dNTP dans du matériel insoluble dans l’acide en 30 minutes à 74°C.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Fidélité (par rapport à Taq)2 X
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
Nbre de réactions200 réactions
En surplombArrondi
PolyméraseADN polymérase riche en GC AccuPrime
Quantité200 réactions
Format de réactionComposants séparés
Conditions d’expéditionHomologué pour des expéditions sur de la glace carbonique ou mouillée
Taille (produit final)5 kb ou moins
Volume100 μlitres
À utiliser avec (application)Hot-start PCR
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réactionÉtalon
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• 1 x 100 μl d’ADN polymérase riche en GC AccuPrime (2 U/µl) • 1 x 1 ml de tampon A riche en GC 5X AccuPrime • 1 x 1 ml de tampon B riche en GC 5X AccuPrime • 1 x 1 ml de MgSO4 à 50 mM
Conserver à -20°C.
Foire aux questions (FAQ)
My oligonucleotide does not appear to be the right length when I checked by gel electrophoresis. Why is this?
Oligos should be run on a polyacrylamide gel containing 7 M urea and loaded with a 50% formamide solution to avoid compressions and secondary structures. Oligos of the same length and different compositions can electrophorese differently. dC's migrate fastest, followed by dA's, dT's, and then dG's. Oligos containing N's tend to run as a blurry band and generally have a problem with secondary structure.
The primers I am using worked for PCR initially, but over time, have stopped working. What happened?
Primers should be aliquoted for single use before PCR set-up. Heat just the aliquoted primers to 94 degrees for 1 min. Quick chill the primer on ice before adding to the PCR reaction. Some primers may anneal to themselves or curl up on themselves.
I don't see a pellet in my oligo tube order. Should I ask for a replacement?
The drying method dries the primer in a thin layer along the sidewalls of the tube instead of the bottom, therefore a pellet is not always visible and should still be ready to use.
There is a ball-shaped pellet at the bottom of my oligo tube. What is this and can I still use my oligo?
If the oligo was overheated, it will appear as a ball-shaped pellet attached to the bottom of the tube. This should not affect the quality of the oligo, and the oligo should be readily soluble in water.
There is a green color in my lyophilized oligo. Can I still use it?
If an oligo appears green in color, this is most likely due to ink falling into the tube. The oligo should still be fully functional. The color can be removed by doing an ethanol precipitation.