Système de RT-PCR One-Step SuperScript™ III avec ADN polymérase Platinum™ Taq

Le système de RT-PCR en une étape SuperScript™ III avec l’ADN polymérase Platinum™ Taq est conçu pour la détection et l’analyse sensibles et reproductibles en point final de molécules d’ARN par RT-PCR. En utilisant cette formulation pratique en une étape, vous pouvez effectuer la synthèse d’ADNc et l’amplification par PCR dans un seul et même tube en utilisant des amorces spécifiques aux gènes ainsi que des ARN cibles provenant soit d’ARN total, soit d’ARNm. Le système utilise un mélange de transcriptase inverse SuperScript™ III et d’ADN polymérase Platinum™ Taq dans un tampon de réaction optimisé, et il peut détecter un large éventail de cibles d’ARN, de 200 bp à 4,5 kb. La quantité de produit de départ peut aller de 0,01 pg à 1 µg d’ARN total. Principaux avantages de ce kit :

• Sensibilité : détection courante pouvant aller jusqu’à 0,01 pg d’ARN total (voir illustration)
• Confort : format en une étape pour plus de vitesse et de praticité, et qui réduit également la variabilité entre les réactions
• Spécificité : utilise la RT SuperScript™ III pour la synthèse d’ADNc jusqu’à 55°C, pour un amorçage plus spécifique avec des amorces spécifiques aux gènes (voir illustration)
• Taille des amplicons : détection compatible de cibles allant jusqu’à 4,5 kb en longueur pour plus de flexibilité

Transcriptase inverse SuperScript™ III
La transcriptase inverse SuperScript™ III est une version de RT M-MLV conçue pour réduire l’activité de la RNase H et fournir une stabilité thermique accrue. L’enzyme peut synthétiser de l’ADNc à une plage de températures allant de 45 à 60°C, offrant une meilleure spécificité, des rendements plus élevés d’ADNc et davantage de produit de pleine longueur que d’autres transcriptases inverses. Comme SuperScript™ III RT n’est pas significativement inhibé par l’ARN ribosomique et de transfert, il peut être utilisé pour synthétiser l’ADNc à partir de l’ARN total.

ADN polymérase Platinum™ Taq
L’ADN polymérase Platinum™ Taq est une ADN polymérase Taq recombinante complexée avec un anticorps exclusif qui bloque l’activité des polymérases à des températures ambiantes. L’activité est restaurée après l’étape de dénaturation en cyclage PCR à 94°C, offrant un “démarrage à chaud” automatique en PCR pour une amélioration de la sensibilité, de la spécificité et du rendement.