Anchored Oligo(dT)20 Primer
Anchored Oligo(dT)<sub>20</sub> Primer
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Anchored Oligo(dT)20 Primer

L’amorce ancrée Oligo(dT)20 est un mélange d’amorces composé d’une chaîne de 20 résidus d’acide désoxythymidylique suivie de dV (dG, dAAfficher plus
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RéférenceQuantité
1257701125 μl
Référence 12577011
Prix (EUR)
255,00
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Quantité:
25 μl
Prix (EUR)
255,00
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L’amorce ancrée Oligo(dT)20 est un mélange d’amorces composé d’une chaîne de 20 résidus d’acide désoxythymidylique suivie de dV (dG, dA ou dC) puis de dN (dA, dT, dG ou dC) En raison de la séquence d’extrémité variable, l’amorce est ancrée à l’extrémité 5´ de la queue poly(A) de l’ARNm et empêche l’amorçage à l’intérieur de la queue poly(A). L’amorce ancrée Oligo(dT)20 est recommandée pour une utilisation dans les protocoles de marquage d’ADNc et dans la RT-PCR.

Contrôle de la qualité : Ce produit est qualifié dans une réaction de synthèse d’ADNc monocaténaire.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Modification de l’amorce de 5’Phosphate
À utiliser avec (application)Synthèse d’ADNc premier brin
Longueur de l’amorce22-mer
Séquence d’amorce5’d PO4 [(T)20VN]3’
Type de produitPrimer
Méthode de purificationPurifié par gel, dessalé
Quantité25 μl
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Concentration2.5 μg/μL
PrimerAmorce Oligo dT ancré
Unit SizeEach
Contenu et stockage
L’amorce ancrée Oligo(dT)20 est fournie à 2,5 µg/µl dans de l’eau traitée au DEPC. Conserver à -20°C. Stabilité garantie pendant 6 mois lorsqu’il est correctement conservé.

Foire aux questions (FAQ)

How does the Anchored Oligo(dT)20 Primer differ from standard oligo(dT) primers?

Anchored Oligo(dT) primers have 2 random bases at the 3' end of the stretch of Ts. The first random base is either an A, G, or C, while the second can be any of the 4 standard nucleotides, i.e., A, T, G or C. The use of anchored oligo(dT) primers results in increased cDNA synthesis yields.

For first-strand cDNA synthesis, is it better to use oligo(dT), random hexamers, gene-specific primer (GSP), or combination of these primers?

The choice of primer depends on your experimental goals. Oligo(dT) is recommended when using total RNA for cDNA synthesis. It is the key to full-length cDNA synthesis. Random hexamers give a series of short first-strand products spanning the entire mRNA. Use of random hexamers may be helpful if the PCR fragment is at the 5´ end of a large mRNA. To ensure full-length cDNA synthesis of large transcripts, oligo(dT) can be added along with random hexamers during first-strand synthesis. Gene-specific primers (GSP) for cDNA synthesis may also be used and are required in a few applications such as 5´ RACE and qRT-PCR. For GC-rich templates or templates rich in secondary structure, a GSP may not work as well as priming with oligo dT for first-strand synthesis. If an RT-PCR is problematic, trying different options of oligo dT, random primers and/or GSP for priming first-strand synthesis may resolve the issue. Oligo(dT)20 primer (Cat. No. 18418-020) is recommended for use with SuperScript III Reverse Transcriptase (Cat. no. 18080-044), ThermoScript Reverse Transcriptase (Cat. No. 12236-014), Thermo-X Reverse Trascriptase (Cat. No. 11150-025), and Cloned AMV Reverse Transcriptase (Cat. No. 12328-019).

Reference:
Frohman,M.A., Dush,M.K., Martin, G.R. (1988) Proc. Nat. Acad. Sci USA 85, 8998