Plasmid pBR322

Le plasmide pBR322 (1) contient trois sites uniques de reconnaissance des endonucléases de restriction dans le gène !-lactamase (AmpR) et huit sites uniques dans le gène TetR. Le plasmide, purifié à partir des E. coli DH10B™, possède également 14 sites uniques de reconnaissance des endonucléases de restriction non sélectionnables. Des sites de clivage uniques pour Hind III et Cla I se trouvent dans le promoteur du gène de résistance à la tétracycline. L’insertion d’ADN dans l’un de ces deux sites entraîne généralement une perte de résistance à la tétracycline.

Tests de performance et de qualité : La pureté, la structure de l’ADN et certains modèles de fragmentation de l’endonucléase de restriction sélectionnés sont vérifiés par analyse sur gel d’agarose. Transformation d’E. Coli HB101 pour confirmer que les gènes AmpR et TetR sont confirmés par un placage sur milieu sélectif.