TRIzol™ Max™ Bacterial RNA Isolation Kit
Invitrogen™

TRIzol™ Max™ Bacterial RNA Isolation Kit

Le kit d’isolement de l’ARN bactérien TRIzol™ Max™ fournit une méthode simple et fiable pour améliorer l’isolement de l’ARN totalAfficher plus
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16096020100 préparations
16096040200 préparations
Référence 16096020
Prix (EUR)
650,00
Each
Quantité:
100 préparations
Prix (EUR)
650,00
Each
Le kit d’isolement de l’ARN bactérien TRIzol™ Max™ fournit une méthode simple et fiable pour améliorer l’isolement de l’ARN total intact des bactéries Gram-positif et Gram-négatif. Le kit utilise à la fois le réactif d’amélioration bactérienne Max™ et le réactif TRIzol™ pour inactiver les ARNases endogènes et favoriser la dénaturation des protéines, en améliorant la qualité et l’intégrité de l’ARN. L’isolement de l’ARN prend environ une heure.

Caractéristiques principales du kit d’isolement de l’ARN bactérien TRIzol™ Max™ :

• Formulé pour l’isolement de l’ARN à partir de bactéries Gram-positif et Gram-négatif
• Utilise deux technologies pour un rendement et une pureté d’ARN maximim
• Minimise le temps nécessaire à l’isolement de l’ARN en éliminant les étapes de lyse enzymatique et mécanique

Deux produits en un kit
Le kit d’isolement de l’ARN bactérien TRIzol™ Max™ associe le réactif d’amélioration bactérienne Max™ au réactif TRIzol™. Un pré-traitement des bactéries de 5 minutes avec le réactif d’amélioration bactérienne Max™, contenant des agents chélateurs, du détergent et un tampon, dénature les protéines bactériennes et désactive efficacement les ARNases endogènes. La lyse bactérienne subséquente par le réactif TRIzol™ génère un produit d’ARN de haute qualité et très peu dégradé.

L’ARN purifié est idéal pour une utilisation avec diverses applications et divers produits
L’ARN bactérien isolé à l’aide du kit d’isolement de l’ARN bactérien TRIzol™ Max™ est adapté aux applications en aval telles que la PCR en temps réel (qPCR), la RT-PCR, le transfert Northern, les tests de protection par nucléase, la synthèse de l’ADNc, l’analyse par biopuces et l’hybridation par transfert de points.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non destiné à une utilisation thérapeutique ou diagnostique sur l’homme ou l’animal
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Volume d’élution50 μl
Type de produit finalARN total
À utiliser avec (application)PCR quantitative en temps réel (qPCR), PCR par transcriptase inverse (RT-PCR), construction de bibliothèques d’ADNc, dosages de protection des nucléases, transfert Northern, clonage
Compatibilité à haut débitNon compatible avec le haut débit (manuel)
Temps de purification1 heures
Quantité100 préparations
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Quantité de matériel de démarrageJusqu’à 1 x 10^8 cellules
Rendement70 µg
Isolation TechnologyExtraction organique
Type d’échantillonBactéries (Gram +/-)
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Comprend 100 ml de réactif TRIzol™ et 20 ml de réactif Max Bacterial Enhancement.

Conserver le réactif TRIzol™ entre 2 et 25°C. Le réactif Max Bacterial Enhancement peut être conservé à température ambiante.

Foire aux questions (FAQ)

The TRIzol Reagent protocol specifies centrifugation speeds of 12,000 x g for 10 mins for RNA precipitation, but my centrifuge only goes up to 5,000 x g. Can I still perform my experiment?

Yes, centrifugation speeds as low as 5,000 to 6,000 x g have been used, but the centrifugation time should be doubled to get the expected yields.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our RNA Sample Collection, Protection, and Isolation Support Center.

I accidentally added too much chloroform to my TRIzol Reagent reaction. What should I do?

If a large amount of chloroform was inadvertently added, you can add more TRIzol Reagent so that the ratio of 0.2 mL chloroform:1 mL TRIzol Reagent is maintained. If too much chloroform is added, this can drive the DNA, and eventually the protein, into the aqueous phase.

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I inadvertently added isopropanol instead of chloroform. What should I do?

If isopropanol is inadvertently added at this step instead of chloroform, add more isopropanol to precipitate everything, then resuspend the pellet in TRIzol Reagent and use the protocol as specified. RNA yields will be compromised, but it may be possible to obtain a product in RT-PCR. A detailed protocol follows:

(1) Add more isopropanol so that the total volume of isopropanol equals the volume of TRIzol Reagent used. Spin at 7500 x g for 10 min at 4 degrees C.
(2) Pour off supernatant; allow relatively compacted pellet to air dry (doesn't have to be completely dry, just reduce the volume of ispropanol).
(3) Estimate the size of the pellet in microliters; add at least 15–20 volumes of TRIzol Reagent (e.g., for a 100 µL pellet, add at least 1.5 mL TRIzol Reagent).
(4) Break the pellet up well (you may have to use a hand-held homogenizer). Store the solution for 10–15 min. at room temperature; every 5 min or so, shake it by hand to make certain it is well dispersed.
(5) Proceed with the TRIzol Reagent protocol as written (i.e., add chloroform). Results will not be optimal, but it may be possible to get a product in RT-PCR.

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What carrier do you recommend for isolation of RNA with TRIzol Reagent?

Glycogen can be included with your sample to improve yield, and remains with the RNA (glycogen is water soluble). Polyacrylamide can also be used as a carrier to precipitate small amounts of RNA.

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At what points can I stop in the protocol for TRIzol Reagent?

There are a couple of possible stopping points in the RNA extraction protocol as shown below:

•After homogenization (before addition of chloroform), samples can be stored at 4 degrees C overnight or at –70 degrees C for at least 1 year.
•Homogenized samples can sit at room temperature for several hours before chloroform is added.
•Homogenized samples can be thawed and refrozen prior to use (necessary when researcher intends to do experiment, but then cannot continue).
• After RNA precipitation, during RNA wash, the RNA can be stored in 75% ethanol for at least 1 year at –20 degreesC, or at least 1 week at 4 degrees C.

For DNA extraction, the phenol phase and interphase can be stored at 4 degrees C overnight before DNA precipitation. Some customers have tried storing at 4 degrees C for a week and –20 degrees C for a year and still got good recovery.

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