Agarose-glutathion Pierce™

L’agarose-glutathion Pierce Thermo Scientific est une résine à hautes capacités et performances idéale pour la purification par affinité des protéines de fusion marquées à la GST provenant de lysats cellulaires.

Caractéristiques de l’agarose-glutathion :

• Pâte— Microbilles d’agarose réticulée à 6 %, en suspension dans de l’eau avec de l’azoture de sodium
• Capacité élevée— Liaison avec au moins 40 mg de protéine GST recombinante purifiée par millilitre de résine
• Rendement élevé et haute pureté— Purification uniforme d’au moins 10 mg de protéines marquées par GST par millilitre de résine, avec une pureté supérieure à 90 %
• Rentable— Résine disponible à un prix abordable, réutilisable au moins cinq fois sans réduction des capacités de liaison et des performances de purification
• Polyvalente— Purification efficace des protéines de fusion avec la GST à partir de lysats bactériens ou afin d’être utilisé avec des protéines prépurifiées marquées par GST afin de réduire les interactions protéiques
• Compatible— Utilisation validée et efficace avec les réactifs de lysats cellulaires Thermo Scientific à extraire et à purifier à partir de cultures cellulaires bactériennes ou de mammifères

Support de haute qualité constitué de glutathion immobilisé par son groupe sulfhydryle central via un bras d’espacement de 12 atomes lié à des microbilles d’agarose réticulée à 6 %. La purification des protéines de fusion marquées par GST avec du glutathion (GSH) sur des microbilles d’agarose est très documentée et peut être adaptée à de nombreuses échelles, différents formats de colonne et des applications spécifiques variées. Que ce soit pour purifier de grandes quantités de protéines recombinantes de lysats E. Coli ou pour analyser des interactions protéiques impliquant des protéines appâts marquées par GST, la résine d’agarose-glutathion convient parfaitement à la tâche.

L’agarose-glutathion Pierce permet de purifier très efficacement des taux élevés de protéines de fusion surexprimées et marquées par GST à partir de lysats bactériens, tels que celles obtenues avec les réactifs Thermo Scientific B-PER pour l’extraction des protéines bactériennes.

L’agarose-glutathion Pierce fonctionne bien lors des procédures de liaison par lots et avec des colonnes de centrifugation à diverses échelles. Ses performances sont comparables ou supérieures à celles des résines GSH populaires fournies par d’autres fabricants.

L’agarose-glutathion Pierce est un support d’affinité de haute qualité, stable et résistant. Les tests confirment l’absence de toute dégradation des performances de la résine après au moins cinq utilisations consécutives. Ces données indiquent que, dans des conditions normales, la résine offre une grande résistance à la dégradation structurelle, ainsi qu’à l’infiltration du ligand.

L’expression et la purification des protéines recombinantes est essentielle aux études de régulation, à la structure et aux fonctions des protéines. La majorité des protéines recombinantes sont exprimées sous forme de fusion avec de courts marqueurs d’affinité ou de petites protéines, comme le glutathion S-transférase (GST). Cette protéine se lie principalement au glutathion réduit (GSH) dans des conditions quasi-neutres et non dénaturantes (p. ex. tampon Tris). La protéine fixée peut être facilement dissociée (éluée) par déplacement compétitif à l’aide d’un tampon contenant du GSH réduit libre (glutathion oxydé ; le GSSH n’est pas efficace à cet effet). Lorsque des protéines d’intérêt sont exprimées sous forme de fusion avec la GST et que du glutathion est immobilisé sur un support solide, ce système de substrat protéique permet de purifier des protéines recombinantes par affinité et d’utiliser ces protéines pour réaliser d’autres expériences.

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