Pierce™ Renilla Luciferase Flash Assay Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ Renilla Luciferase Flash Assay Kit

Le kit de dosage incandescent de la luciférase Renilla Pierce Thermo Scientific fournit aux chercheurs un dosage très sensible pourAfficher plus
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RéférenceQuantité
16165Kit de 1000 réactions
16164Kit de 100 réactions
Référence 16165
Prix (EUR)
1 228,00
Each
Quantité:
Kit de 1000 réactions
Prix (EUR)
1 228,00
Each
Le kit de dosage incandescent de la luciférase Renilla Pierce Thermo Scientific fournit aux chercheurs un dosage très sensible pour l’activité transcriptionnelle des éléments réglementaires dans les milieux de culture cellulaire de mammifères et le lysat cellulaire entier.

Caractéristiques du kit de dosage incandescent de la luciférase Renilla :

Sensible—une sensibilité accrue permet l’utilisation d’un plus petit nombre de cellules
Économique—les dosages les plus sensibles entraînent une diminution de la consommation de réactifs
Gain de temps—les dosages utilisant des luciférases sécrétées nécessitent une manipulation minimale des échantillons
Compatible avec l’automatisation—capable de réaliser des criblages à haut débit à des écrans à haut débit
Pratique—contient un tampon de lyse cellulaire universel et un réactif de dosage incandescent optimisé
Sûr—permet d’effectuer des dosages non radioactifs

Ce kit de dosage incandescent contient des réactifs pour mesurer l’activité de la luciférase Renilla dans les lysats cellulaires de mammifères. Lorsqu’il est utilisé avec les plasmides de luc. Renilla verte de Thermo Scientific, le kit fournit un système de dosage de rapporteur bioluminescent extrêmement sensible pour la détection intracellulaire de l’activité du promoteur ou de la voie. Le signal produit par la Luc. Renilla verte est considérablement supérieur aux signaux provenant de luciférases soit de lucioles natives soit Renilla, dosées dans des conditions similaires. Le rendement lumineux capté à l’aide d’un luminomètre peut être corrélé avec la quantité de protéine luciférase Renilla produite et utilisée pour déterminer l’activité du promoteur dirigeant l’expression de la Renilla.

Comprend :
Tampon de lyse cellulaire, tampon de réaction et substrat

Nécessite :
Luciférase Renilla et luminomètre ou tout autre instrument capable de surveiller la luminescence, tels que les lecteurs de microplaques Luminoskan Ascent et Varioskan Flash de Thermo Scientific

Applications :
• Études de promoteurs pour l’analyse des éléments de régulation cis et des facteurs d’action trans
• Sélection de médicaments
• Sélection de siARN et de miARN
• Dosages multiplexés pour l’étude des effets hors-cible
• Dosages de rapporteurs pour la localisation de protéines
• Analyse de voies de transduction de signaux
• Études d’épissage d’ARN

La luciférase de Renilla verte est une protéine de 36 kDa produite par un dérivé du gène sauvage de luciférase de Renilla de la pensée de mer, Renilla reniformis. Par rapport à la luciférase sauvage, la Renilla verte est plus stable dans le sérum et possède un spectre d’émission décalé vers la région verte. La protéine fournit un signal incandescent extrêmement lumineux qui se décompose rapidement. Le réactif du kit de dosage incandescent de Renilla Pierce optimise ce signal pour une utilisation dans les dosages de rapporteur de luciférase de type incandescente. Le kit est également compatible pour les dosages incandescents avec d’autres luciférases de Renilla et des dérivés qui se servent de la coelentérazine comme substrat.

Plus d’informations sur le produit
Dosages de la luciférase dans des cellules Jurkat difficiles à transfecter
Luciférases polyvalentes : luminomètres à microplaques et dosages incandescents de la luciférase

Produits associés
Kit de double dosage de luciférase Renilla-luciole Pierce™

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
DoserEnzyme rapporteur, dosage par rapporteur de luciférase
Cellules compatiblesCellules de mammifères
Méthode de détectionBioluminescent
À utiliser avec (équipement)Luminomètre (microplaque)
FormatPlaque à 384 puits, plaque à 96 puits
Type d’étiquetteMarquage enzymatique
Gamme de produitsPierce
QuantitéKit de 1000 réactions
SubstratCoélentérazine
Propriétés du substratSubstrat chimique
Type de substratSubstrat de luciférase
CibleLuciférase, luciférase de Renilla verte
TechniqueChimiluminescence améliorée
TypeKit d’essai
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• Tampon de dosage incandescent Renilla, 50 ml, stocker à 4°C
• Coelentérazine (100X), 0,5 ml, stocker à -80°C
• 2X tampon de lyse cellulaire, 60 ml, stocker à température ambiante

Foire aux questions (FAQ)

I got a high background signal with a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What went wrong?

Here are possible causes and solutions:

- Non-specific oxidation of substrate: Use less serum in the cell culture media; Note: Albumin can increase the auto-oxidation of Vargulin; Avoid repeated freezing and thawing of the sample.
- Control sample is contaminated: Use new sample; Change pipette tips after each well.

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I am getting a high saturating signal with a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What could have happened?

This could be due to high luciferase expression. Here are some suggestions:

  • Reduce incubation time before collecting samples. 
  • Decrease the integration time on the instrument.
  • Dilute the sample: for secreted Gaussia/Cypridina Luciferase, dilute the sample using media from the cell culture; for cell lysate, dilute the sample using lysis buffer 


  • Note: A low sample volume can increase assay variability. Dilute the sample and use the recommended volume of 10-20 µL per assay.

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    Why am I getting a low signal in lysate using a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay? Can you provide some suggestions?

    Here are possible causes and solutions:

    - Non-optimized lysis buffer used: Assay luciferase activity in the media to confirm good expression of luciferase; Use only the provided lysis buffer.
    - Low luciferase expression: Lyse cells in smaller volume of 1X Cell Lysis Buffer; Use a different promoter or growth conditions to improve expression; Increase the integration time on the instrument; Scale up volume of sample and reagent per well.

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    I got a low signal in media when I used a Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. What happened?

    Here are possible causes and solutions:

    - Insufficient luciferase accumulation in media: Incubate cells for a longer time.
    - Low luciferase expression: Use less media per well during the experiment;.Use a different promoter or growth conditions to improve expression;.Increase the integration time on the instrument;.Scale-up the volume of sample and reagent per well.
    - Treatment interfered with cellular secretory pathway: Transfect cells with a plasmid for constitutive expression of Luciferase (i.e., with pTK or pCMV promoter); Determine if luciferase actively expresses in media without treatment. Add treatment; Determine if there is a corresponding drop in luciferase activity from the constitutively expressed plasmid.

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    I am getting no signal with my Gaussia/Cypridina/Renilla Luciferase Glow/Luciferase Flash assay. Why is this?

    Here are possible causes and solutions:

    - Low transfection efficiency: Optimize transfection conditions using a visual transfection control (e.g., a plasmid over-expressing a fluorescent protein); Verify plasmid DNA quality - use only transfection grade DNA; Use actively dividing, low passage cells; Use a different cell type.
    - No or low promoter activity: Use conditions known for promoter activation; Incubate cells for a longer time; Change growth conditions to improve expression; Use a different promoter.
    - Substrate auto-oxidized: Protect substrate from light and air; Maintain 100X Coelenterazine at -80 degrees C; maintain 100X Vargulin at -80 degrees C; Prepare new Coelenterazine Working Solution if used longer than 8 hours; Prepare new Vargulin Working Solution if used longer than 2 hours

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