Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT) Buffer

Le désoxyribonucléotidyl transférase terminale, recombinant (rTdT), est un ADN polymérase qui catalyse l’addition de désoxynucléotides au terminal 3fi hydroxyle de l’ADN. Un bulletin technique sur le TdT est disponible.

Applications : Ajout d’extension homopolymère aux vecteurs et inserts pour clonage. Marquage des oligonucléotides avec de la biotine (1,2), marquage ³²P ou ³⁵S (3) ou dans l’apoptose (TUNEL) (4,5).

Source : Purifié à partir d’un clone de baculovirus de thymus de veau TdT.

Tests de performance et de qualité : Test de l’endonucléase, de l’exodésoxyribonucléase 3´ et 5´ et des niveaux d’incorporation.

Définition de l’unité : Une unité incorpore le dATP 1 nmol dans une substance précipitable à l’acide en 1 h à 37°C, en utilisant d(pA)₅₀ comme amorce.

Avertissement de danger : Toxique ; cacodylate de potassium contenu dans le tampon de réaction. Contient également du chlorure de cobalt, un produit chimique hautement toxique.
Reportez-vous à la FDS.

Conditions de réaction de l’unité : 0,2 M de cacodylate de potassium (pH 7,2), 10 mM de MgO₄ C₄ H₆, 1 mM de 2-mercaptoéthanol, 0,5 mg/ml de BSA,
100 FLM d(pA)₅₀, 1 mM de [³H]dATP et enzyme dans 0,15 ml pendant 1 h à 37°C.