La collagénase est une protéase qui coupe la liaison entre un amino-acide neutre (X) et de la glycine dans laAfficher plus
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Référence
Quantité
17100017
1 g
17018029
500 mg
2 options
Référence 17100017
Prix (EUR)
300,00
Each
Quantité:
1 g
Prix (EUR)
300,00
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La collagénase est une protéase qui coupe la liaison entre un amino-acide neutre (X) et de la glycine dans la séquence Pro-X-Gly-Pro, qui est très fréquente dans le collagène. La collagénase se distingue des autres protéases par sa capacité à dégrader les fibrilles de collagène naturel à triple hélice couramment rencontrées dans les tissus conjonctifs comme la peau, les tendons, les vaisseaux sanguins et les os. La désagrégation de la collagénase est adaptée à la culture des tumeurs humaines, du rein de la souris, du cerveau humain et fœtal et de nombreux autres tissus, notamment l’épithélium. La collagénase est relativement douce, se dissocie bien à la température physiologique et au pH, et ne nécessite aucune agitation mécanique ni équipement spécial.
La collagénase Gibco™ de type I est isolée de Clostridium histolyticum et conditionnée sous forme de poudre lyophilisée non stérile pour une utilisation en recherche dans la dissociation cellulaire ou tissulaire et dans les perfusions d’organes. L’activité de la collagénase Gibco™ de type I est garantie supérieure à 125 unités / mg. Par rapport à d’autres préparations à la collagénase, la collagénase Gibco™ de type I présente des niveaux moyens de collagénase, de caséine, de clostripaïne et d’activités tryptiques, et convient bien à la digestion de cellules ou de tissus adipeux, hépatiques et surrénaux.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Quantité1 g
Durée de conservation24 mois
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
FormeLyophilisé
Type de produitCollagénase
StérilitéNon stérile
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conditions de stockage : 2°C à 8°C À l’abri de la lumière Conditions d’expédition : température ambiante Durée de conservation : 24 mois à compter de la date de fabrication
Foire aux questions (FAQ)
Can collagenase be used to dissociate feeder free hESC when cultured on CELLstart medium?
Yes, collagenase can be used. It is recommended to use a 10 mg/ml collagenase IV solution (0.5 ml per 6 cm dish). After 1 minute, remove collagenase and rinse cells. Scrape cells into wash buffer (see product manual for more information), pellet, and re-plate as desired.
How do I make the 1000X stock (100 U/µL) solution from Collagenase powder?
1. Add 1 mL Hanks' Balanced Salt Solution (HBSS) with calcium and magnesium directly to 1 g vial of Collagenase. Vortex gently to ensure complete dissolution. Transfer to a clean tube.
2. Determine volume of HBSS (with calcium and magnesium) required to bring collagenase solution to 100 U/µL (1000X stock solution). The activity is lot- specific. Rinse vial with this volume of HBSS (with calcium and magnesium), and combine. Filter sterilize 1000X stock solution with a low protein binding filtration unit.
Example: Assuming the lot you have purchased has an activity of 265 U/mg, this lot will have 265000 Units per mL when you reconstitute collagenase into HBSS (with calcium and magnesium) at 1 g/mL. In order to dilute 265000 U/L to 100000 U/mL (= 100 U/µL), you need to dilute the 1 g/mL enzyme solution 2.65 fold.
What reagents do you offer for cell dissociation, and what are the main differences between them?
Please use this selection chart that compares our cell dissociation reagents (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/trypsin.html).
'Real-time measurements of second messengers in living cells, such as cAMP, are usually performed by ratiometric fluorescence resonance energy transfer (FRET) imaging. However, correct calibration of FRET ratios, accurate calculations of absolute cAMP levels and actual permeabilities of different cAMP analogs have been challenging. Here we present a protocol that ... More