Transcriptase inverse SuperScript™ II
Invitrogen™

Transcriptase inverse SuperScript™ II

La transcriptase inverse Invitrogen SuperScript II est une transcriptase inverse (RT) M-MLV génétiquement modifiée avec une activité réduite de RNaseAfficher plus
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La transcriptase inverse Invitrogen SuperScript II est une transcriptase inverse (RT) M-MLV génétiquement modifiée avec une activité réduite de RNase H et une stabilité thermique accrue par rapport à la RT M-MLV de type sauvage. Les mutations dans le domaine de la RNase H de l’enzyme éliminent la dégradation de l’ARN lors de la synthèse d’ADNc premier brin, ce qui produit des rendements plus élevés d’ADNc pleine longueur.

Les RT SuperScript sont les RT les plus fiables et les plus largement utilisées avec plus de 50 000 citations, revues et publications à ce jour.

Remarque : Le dernier membre de la famille RT SuperScript, la transcriptase inverse SuperScript IV, offre une thermostabilité, une processivité, des rendements et des performances accrus avec tous les échantillons d’ARN, y compris ceux de pureté ou d’intégrité sous-optimale.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de produit finalADNc premier brin
FormatTube
Nbre de réactions200 réactions
Température de réaction optimale42°C
Quantité4 x 10,000 units
Format de réactionComposants séparés
Type de réactifTranscription inverse
Transcriptase inverseSuperScript II
Activité de la ribonucléase HRéduction
Conditions d’expéditionGlace humide
Taille (produit final)Jusqu’à 12,3 kb
Matériau de départARN
TechniqueTranscription inverse
Concentration200 U / μl
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réaction50 min
Unit SizeEach
Contenu et stockage

• Transcriptase inverse SuperScript II, 4 x 10 000 unités (200 U/μl)
• Tampon premier brin 5X
• DTT (100 mM)

Conserver à –20°C.

Foire aux questions (FAQ)

How can I remove genomic DNA contamination from my sample prior to performing RT-PCR?

We recommend using ezDNase (Cat. No. 11766051). ezDNase Enzyme's high specificity for double-stranded DNA enables efficient and fast genomic DNA removal without reduction in the quality or quantity of RNA. ezDNase Enzyme is heat-labile and so can be easily deactivated by heat treatment at moderate temperature (55 degrees C). These features make ezDNase Enzyme an excellent choice for genomic DNA removal prior to reverse transcription reactions.

How much RNA should be employed for first-strand cDNA synthesis?

The amount of RNA template for a cDNA synthesis is highly flexible and depends upon the amount of sample available and an individual's need. In general, 1 µg total RNA is used in a typical 20-µL RT reaction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within ourReverse Transcription and RACE Support Center.

Should I treat the cDNA with RNase H prior to downstream processing?

RNase H treatment is not always necessary. Many PCR reactions work without it. However, for cDNA synthesized with RNase H-deficient reverse transcriptases (like SuperScript II, III, and IV), RNA/cDNA hybrids—especially GC-rich ones—may not denature well, reducing PCR sensitivity. RNase H treatment can help in such cases. Additionally, RNase H treatment is beneficial for cloning larger fragments.

What percentage of RNA is converted to cDNA when performing reverse transcription?

This depends highly on the quality of the sample. mRNA itself makes up 1-5% of total RNA. Depending on the primer and enzyme used, reverse transcription can covert >70% of that into cDNA.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Reverse Transcription and RACE Support Center.

I'm setting up my RT reaction and am trying to decide whether I should use random primers, oligo(dT) primer, gene-specific primer, or oligo(dT)/random mix primers. What would you suggest?

Random primers are the best choice for degraded RNA, RNA with heavy secondary structure, non-polyadenylated RNA, or prokaryotic RNA. It is recommended only for two-step RT-PCR, and typically gives the highest yields, although the cDNA may not necessarily be full length. Oligo(dT) primers are good to use when trying to recover full-length cDNA from 2-step RT-PCR. The reaction is influenced by secondary structure and RNA quality. Gene specific primers should be used for very specific, mainly one-step RT-PCR reactions.

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