Tampon de déshybridation de transfert Western Restore™

Le tampon de déshybridation pour transfert Western Thermo Scientific Restore élimine, de manière sécurisée et efficace, tous les anticorps primaires et secondaires des membranes en nitrate de cellulose et en PVDF afin de permettre la réhybridation des transferts Western chimiluminescents.

Caractéristiques du tampon de déshybridation pour transfert Western Restore :

• Gain de temps — il n’est pas nécessaire de réanalyser les gels et les transferts
• Permet d’économiser des échantillons coûteux— réhybride la membrane à l’aide du même échantillon cible
• Efficace — formulation plus efficace en ce qui concerne la déshybridation des anticorps que les tampons artisanaux
• Doux — n’endommage pas l’antigène cible durant la déshybridation, ce qui permet une réhybridation efficace
• Sans odeur — aucun mercaptan, donc aucune odeur âcre
• Économique — moins onéreux que d’autres tampons de déshybridation disponibles dans le commerce

Détails du produit
La réalisation d’électrophorèses sur gel et de dosages d’immunoempreintes doubles pour mener des tests sur des anticorps primaires ou des concentrations d’anticorps nouveaux est chronophage et onéreuse. Le tampon de déshybridation pour transfert Western Restore élimine ces pertes lors de la détection d’immunoempreintes avec des substrats de transfert Western chimiluminescents. Le tampon de déshybridation Restore permet d’éliminer les anticorps primaires et secondaires des immunoempreintes de manière propre et efficace, sans enlever ni endommager l’antigène immobilisé, ce qui permet la déshybridation et la réhybridation sans risque des transferts.

La détection par Western blot chimiluminescent, tels que les substrats Thermo Scientific SuperSignal pour la péroxydase de raifort, constitue l’une des méthodes les plus courantes et sensibles utilisées de nos jours. Dans la mesure où ces substrats ne précipitent pas et ne se lient pas à la surface des membranes, les transferts Western détectés par chimiluminescence peuvent être déshybridés avec des réactifs qui éliminent les anticorps primaires et secondaires liés par affinité. Pour être efficace, un tampon de déshybridation doit être suffisamment puissant pour dissocier les anticorps liés mais suffisamment doux pour laisser intactes les protéines cibles transférées sur la membrane en nitrate de cellulose ou en PVDF. Le tampon de déshybridation pour transfert Western offre ces caractéristiques.

En réalisant une déshybridation et une réhybridation, aucun échantillon rare ou onéreux n’a besoin d’être gaspillé par l’analyse de nombreux gels afin de réhybrider différentes cibles. Une membrane simple d’un seul gel peut être déshybridée avec le tampon de déshybridation pour transfert Western Restore afin d’éliminer les anticorps primaires. La déshybridation du transfert ne prend que 15 à 30 minutes, selon l’affinité de l’anticorps primaire. Après déshybridation, bloquez et réhybridez avec un nouvel anticorps primaire. Autrement, un transfert peut être déshybridé et hybridé de nouveau en utilisant les mêmes anticorps à des concentrations ajustées ou optimisées lorsque des quantités incorrectes ont été initialement utilisées comme indiqué par les mauvais résultats.

Applications
• Réutiliser un transfert en nitrate de cellulose ou en PVDF pour détecter une cible différente avec un anticorps primaire différent
• Réhybrider un transfert pour corriger ou optimiser les concentrations d’anticorps qui étaient inefficaces la première fois.

Résumé du protocole
• Laver le transfert pour éliminer le substrat chimiluminescent.
• Laisser incuber le transfert dans le tampon de déshybridation pour transfert Western Restore pendant 5 à 15 minutes à 37°C (la température ambiante suffit pour certains anticorps).
• Retirez le transfert et lavez dans du tampon de lavage (TBS-T ou PBS-T).
• Vérifier qu’il y a eu suffisamment d’anticorps retirés
• Effectuez l’expérience d’immunoempreinte suivante.