EZ-Link™ NHS-SS-PEG4-Biotin

Le NHS-SS-PEG4-Biotine Thermo Scientific EZ-Link inclut des groupes disulfure et polyéthylène glycol (PEG) dans son bras espaceur pour assurer une biotinylation clivable et améliorant la solubilité.

Caractéristiques du NHS-SS-PEG4-Biotine EZ-Link :

• Marquage des protéines : anticorps biotinylés ou autres protéines pour la détection ou la purification à l’aide de résines ou de sondes de streptavidine
• Amino-réactif : réagit avec les amines primaires (-NH2), comme les chaînes latérales de la lysine (K) ou avec les terminaisons amino des polypeptides
• Clivable : la liaison de disulfure dans le bras espaceur permet d’éliminer le marqueur de biotine à l’aide d’agents de réduction tels que le DTT ; seul un petit groupe sulfhydrile reste fixé à la molécule
• Pégylé : le bras espaceur contient un groupe polyéthylène glycol (PEG) hydrophile à 4 unités
• Améliore la solubilité : la pégylation confère à la molécule biotinylée une hydrosolubilité, ce qui permet de prévenir l’agrégation des anticorps biotinylés stockés en solution
• Longue portée : le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) est de 37,9 angströms ; ceci réduit l’encombrement stérique lors de la liaison aux molécules d’avidine

Le NHS-SS-PEG4-Biotine EZ-Link Thermo Scientific permet un marquage simple et efficace à la biotine des anticorps, des protéines et de toutes les autres macromolécules à teneur en amines primaires. L’ester N-hydroxysuccinimide (ester NHS) réagit spécifiquement et efficacement avec les groupes amino lysine (K) et à extrémité N-terminale des protéines et des peptides à pH 7-9 pour former des liaisons amidiques stables. Le bras espaceur de polyéthylène glycol (PEG) hydrophile confère une hydrosolubilité qui est transférée vers la molécule biotinylée, réduisant ainsi l’agrégation des protéines marquées stockées en solution. La liaison disulfure intégrale permet au groupe biotine d’être clivé de la molécule marquée à l’aide du DTT ou d’autres agents de réduction, ce qui permet une récupération efficace des complexes protéiques liés à l’avidine dans les essais d’affinité.

Nous fabriquons des réactifs à la biotine pour garantir l’intégrité, la cohérence et les performances globales les plus élevées possible pour les applications de recherche prévues.

Les esters N-Hydroxysulfosuccinimide (NHS) de la biotine sont les réactifs de biotinylation les plus répandus. Les biotines activées par NHS réagissent efficacement avec les groupes amines primaires (-NH2) des tampons alcalins pour former des liaisons amides stables. Les protéines (par ex., anticorps) possèdent plusieurs amines primaires qui sont disponibles sous forme de cibles pour le marquage, notamment la chaîne latérale des résidus de lysine (K) et les extrémités N-terminale de chaque polypeptide.

Grande variété de biotines Les réactifs d’ester NHS diffèrent en longueur, solubilité, perméabilité cellulaire et clivabilité. Les réactifs NHS-biotine non sulfonatés sont perméables aux cellules, mais doivent être dissous dans un solvant organique comme le DMSO ou le DMF. Les sulfo-NHS biotine (et ceux avec les espaceurs pégylés) sont directement solubles dans l’eau mais pas perméables aux membranes. Les variétés contenant des ponts disulfures peuvent être clivées à l’aide d’agents de réduction ; il est alors possible de déconnecter le groupe biotine de la protéine marquée.