EZ-Link™ NHS-PEG Solid-Phase Biotinylation Kit - Mini-Spin Columns

Les kits Thermo Scientific de biotinylation en phase solide NHS-PEG EZ-Link offrent une approche sur colonne de la biotinylation des anticorps ciblés par les amines qui permet un meilleur contrôle de la réaction de marquage et du processus de nettoyage.

Caractéristiques du kit de biotinylation en phase solide EZ-Link NHS-PEG :

• Convient aux réactions à plus grande échelle : 1 à 10 mg d’anticorps
• Marquage et purification rapides : l’ensemble de la procédure ne prend qu’une heure
• Élimination facile du réactif de marquage dépensé et excédentaire : il suffit de laver les sous-produits de réaction, pas besoin de dialyse ou de filtration sur gel
• Pas d’effets de dilution : la méthode en phase solide permet de récupérer les anticorps dilués initialement dans un volume plus petit après le marquage
• Protocoles optimisés : des protocoles spécifiques pour l’anticorps garantissent un niveau de marquage approprié (2 à 5 biotines par molécule d’anticorps), minimisant ainsi la possibilité d’inactivation causée par un marquage excessif
• Réactif de biotine à hautes performances : le NHS-PEG4-Biotine utilise une chimie d’ester NHS spécifique aux amines efficace et inclut un espaceur en polyéthylène glycol (PEG) hydrophile qui stabilise la solubilité à long terme des anticorps marqués
• Huit expériences de marquage de la biotine par kit : l’emballage No-Weigh Thermo Scientific garantit que le réactif de biotine est pleinement actif pour huit expériences distinctes

Ce système innovant de marquage d’anticorps utilise l’agarose chélatée au nickel pour immobiliser temporairement les molécules d’anticorps via leurs régions Fc riches en histidine. Une fois maintenu en place sur la résine, l’anticorps peut être biotinylé sur les amines primaires avec le réactif NHS-PEG4-Biotine à stabilisation de solubilité de haute qualité. Les réactifs de marquage en trop et les sous-produits sont ensuite lavés avant de récupérer l’anticorps marqué et purifié de la résine à l’aide d’une solution d’imidazole légère. Aucune filtration sur gel ni dialyse n’est nécessaire.

Les kits de biotinylation en phase solide EZ-Link utilisent une stratégie innovante pour la biotinylation des anticorps qui simplifie le processus à bien des égards, ce qui permet au novice et à l’expert de réussir les tâches de biotinylation. La stratégie consiste à fixer l’anticorps à un support d’affinité à chélation métallique et à effectuer la biotinylation en phase solide.

Les anticorps se lient facilement aux supports à chélation métallique, tels que le nickel ou le cobalt, se liant principalement à la région Fc riche en histidine d’anticorps de classe IgG. Cette fonction permet d’effectuer facilement la chimie de dérivation pendant que l’anticorps est lié au support. Cette stratégie facilite la livraison et l’élimination du réactif dépensé. L’anticorps modifié qui en résulte est ensuite retiré de manière sélective du support par élution avec une solution d’imidazole tamponnée.

L’approche en phase solide de la biotinylation des anticorps permet de mieux contrôler la réaction. Par exemple : Les rapports de réactifs et d’anticorps et les temps de réaction peuvent être ajustés pour obtenir le degré approprié de biotinylation pour l’application prévue.

Les kits contiennent un réactif spécifique à un groupe amino soluble aqueux (NHS-PEG4-Biotine) qui cible les groupes amino (-NH2) accessibles à la surface de l’anticorps. Le format peut être appliqué au niveau d’anticorps de plusieurs milligrammes dans le kit de colonnes de 1 ml (réf. 21440) ou à des niveaux d’anticorps de quelques microgrammes pour les biotinylations à l’aide du kit de mini-colonnes de centrifugation (réf. 21450).

Produits associés
Kit de biotinylation en phase solide NHS-PEG EZ-Link™, colonne de 1 ml