Le kit de co-immunoprécipitation Thermo Scientific Pierce fournit tous les composants nécessaires pour effectuer une expérience de co-immunoprécipitation correctement contrôlée et obtenir des produits purifiés sans interférence des anticorps dans le produit final.

La co-immunoprécipitation est couramment utilisée pour étudier les interactions protéines:protéines. Elle utilise un anticorps pour immunoprécipiter l’antigène (protéine “appât”) et pour co-immunoprécipiter les protéines interagissantes (protéines “proie”). Les méthodes classiques de co-immunoprécipitation qui utilisent la protéine A ou G se soldent par la co-élution des chaînes lourdes et légères d’anticorps, qui peuvent co-migrer avec les bandes appropriées, masquant ainsi des résultats importants. Le kit de co-immunoprécipitation Pierce résout ce problème en couplant les anticorps par covalence dans une résine réactive aux amines. Il comprend des tampons optimisés pour la liaison et la récupération protéiques, des réactifs pour effectuer des expériences de contrôle, des colonnes de centrifugation efficaces et des tubes de prélèvement qui raccourcissent le protocole et réduisent la manipulation et le mélange.

Caractéristiques du kit de co-immunoprécipitation :

• Efficace pour n’importe quel anticorps purifié : effectuez des expériences de co-immunoprécipitation avec des anticorps purifiés, quels que soient les dérivés ou la classe Ig (IgY de poulet, IgE humain, IgG1 de souris, IgM, etc.). Aucune dépendance de la liaison par affinité des protéines A et G
• Aucune interférence de l’anticorps : l’adhérence covalente et le système d’élution non réductrice génèrent des produits purs de co-immunoprécipitation sans contamination par l’anticorps IP
• Microbilles réutilisables d’anticorps : l’immobilisation covalente de l’anticorps permet à la résine d’immunoprécipitation préparée d’être réutilisée, permettant des économies potentielles d’anticorps onéreux
• Kit complet : tous les réactifs pour l’immobilisation de l’anticorps et de nombreuses expériences d’immunoprécipitation, notamment les tampons de liaison et de lavage, le tampon d’élution et les colonnes pratiques de microcentrifugation, pour faciliter et accroître l’efficacité des manipulations de résine.
• Microbilles de contrôle incluses : billes d’agarose non dérivatisées et fournies pour effectuer le contrôle négatif de liaison non spécifique
• Polyvalence : la méthode de co-immunoprécipitation est compatible avec tout tampon d’échantillon protéique physiologique (non dénaturant), qui est compatible avec l’anticorps-antigène spécifique et le complexe d’interaction protéique.

La co-immunoprécipitation (Co-IP) est une méthode in vitro appréciée pour découvrir les interactions protéiques. Le kit de co-immunoprécipitation Pierce est configuré en vue de fournir les outils indispensables pour assurer l’efficacité des expériences de co-immunoprécipitation et produire des produits IP et Co-IP purs exempts d’anticorps IP problématiques. La technique Co-IP classique a été améliorée en remplaçant les microbilles d’agarose des protéines A et G par la résine AminoLink Plus, à laquelle des anticorps IP purs peuvent être conjugués directement et indirectement. Le tampon doux d’élution (non réducteur et non dénaturant) permet de dissocier les cibles IP tout en retenant l’anticorps immobilisé sur les billes d’agarose. Il en résulte un produit pur que le transfert Western peut analyser (voire séquencer) sans interférence de l’anticorps.

Outre l’élimination de la contamination de l’anticorps par IP, la méthode anticorps-conjugaison, qui fait partie intégrante du kit Co-IP Pierce, évite les interactions de liaison non spécifique et la contamination par lessivage, qui peuvent résulter des méthodes classiques avec les protéines A et G. Bien que la méthode de conjugaison exige que l’anticorps de départ soit un tampon exempt d’amines sans BSA, gélatine ou autre stabilisant protéique de stockage, le fait qu’elle ne dépende pas de la protéine A ou G signifie que le dérivé de l’anticorps ou la classe peut servir à l’immunoprécipitation (p. ex. IgM et IgY de poulet). En effet, toute protéine purifiée peut être immobilisée dans un souci de purification par affinité des partenaires de liaison.