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Le substrat à durée prolongée Thermo Scientific SuperSignal West Dura est un substrat de peroxydase de raifort (HRP) à chimiluminescence optimisée (ECL) à base de luminol avec une sortie lumineuse stable pour la détection de niveau de femtogramme moyen pour l’analyse de transfert Western.
Caractéristiques du substrat à durée prolongée SuperSignal West Dura : • Sensibilité : quantités moyennes de femtogrammes • Stabilité : Stabilité de la solution de travail pendant 24 heures ; stabilité du kit pendant 1 an à température ambiante • Compatibilité : membranes en nitrate de cellulose et en PVDF • Durée du signal : 24 heures • Concentration d’anticorps primaire recommandée : 1:1 000 – dilution 1:50 000 (0,02 – 1,0 µg/ml) • Concentration d’anticorps secondaires recommandée : 1:50 000–Dilution 1:250 000 (4–20 ng/ml)
Le substrat à durée prolongée SuperSignal West Dura pour HRP est optimisé pour une sensibilité élevée et une longue durée de signal : il convient particulièrement aux systèmes de détection à caméras CCD refroidis. Contrairement aux substrats avec des signaux qui diminuent jusqu’à des niveaux à peine détectables en 30 – 60 minutes, le signal produit avec le substrat chimiluminescent SuperSignal West Dura est stable pendant 24 heures, ce qui permet de réaliser de multiples expositions de film ou de caméra.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Contenus des kitsAmplificateur luminol, 100 ml, Tampon peroxyde stable, 100 ml
Suffisant pour25 transferts sur mini-gels, 2 000 cm2 de membrane
Méthode de détectionChimiluminescence
À utiliser avec (application)Western Blot
FormeLiquide
Membrane CompatibilityNitrate de cellulose, PVDF
Gamme de produitsSuperSignal
Type de produitSubstrat
Quantité200 mL
SubstratePeroxydase de raifort
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Suffisant pour : 25 transferts sur mini-gels ; 2 000 cm2 de membrane • Luminol / séquence activatrice, 100 ml • Tampon peroxyde stable, 100 ml
Conserver à température ambiante.
Foire aux questions (FAQ)
What types of membrane work best with SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate?
Most researchers use nitrocellulose or polyvinyldiflouride (PVDF) membranes with SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate. Both work well, although nitrocellulose seems to be better suited in some applications than PVDF. In addition, charge-modified nylon membrane performs well with this substrate. Please also see our guide for choosing western blot membranes (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/western-blotting/transfer-proteins-western-blot/membranes-transfer-buffers-western-blotting/membranes-western-blotting.html).
Will SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate work with nucleic acid blots (Southern blotting, etc.)?
Yes. However, SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate was optimized for use in Western blots and is generally not sensitive enough for most nucleic acid protocols. For Southern and Northern blotting, use our North2South Chemiluminescent Nucleic Acid Hybridization and Detection Kit (Cat. No. 17097), North2South Chemiluminescent Substrate for HRP (Cat. No. 17295), or the Chemiluminescent Nucleic Acid Detection Kit, if probing for biotinylated probes (Cat. No. 89880).
I used the SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate. Why is the entire film black or showing a reversed image?
The antibody concentration (primary and secondary) is too high. Use the antibody dilutions described in the product instructions. Most background will disappear when the proper blocking reagent and a HRP conjugate concentration are used.
Why do I see more bands with the SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate than I've seen in the past with other substrates?
Because this substrate is more sensitive than other chemiluminescent substrates you might detect low-abundance proteins that were not visible before. When using a more sensitive substrate, more careful optimization of blocking buffer steps and antibody concentrations is required.