ADN polymérase AmpliTaq Gold™ avec tampon Gold et MgCl2
Citations et références (2)
Applied Biosystems™
ADN polymérase AmpliTaq Gold™ avec tampon Gold et MgCl2
L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ est une version chimiquement modifiée de l’ADN polymérase AmpliTaq™ nécessitant une activation thermique. Fonctions de cetteAfficher plus
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L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ est une version chimiquement modifiée de l’ADN polymérase AmpliTaq™ nécessitant une activation thermique. Fonctions de cette enzyme :
• Enzyme à démarrage à chaud chimique automatisée pour une meilleure spécificité, une sensibilité accrue et un meilleur rendement • L’activation thermique progressive améliore la sensibilité des amplifications à faible nombre de copies • La PCR multiplex réussie permet un gain de temps et une économie de réactifs • Comprend le tampon GeneAmp™ 10X PCR Gold avec MgCl2
Activation du démarrage à chaud L’enzyme modifiée est fournie dans un état inactif. Sous l’effet d’une activation thermique, l’agent modificateur est libéré de façon permanente, régénérant ainsi l’enzyme active. L’amplification par PCR à démarrage à chaud qui en résulte offre une sensibilité, une spécificité et un rendement accrus par rapport aux techniques PCR classiques.
Spécificité accrue, rendement plus élevé L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ peut être activée partiellement ou complètement à une étape de chaleur pré-PCR ou peut être activée lentement et de manière progressive pendant les étapes de dénaturation du cycle thermique. Lors du thermocyclage, l’enzyme active est libérée progressivement, avec ou sans étape d’activation thermique immédiate limitée, de façon à s’aligner sur la concentration du modèle et à augmenter la spécificité. Les réactifs n’étant pas perdus dans la formation de produits indésirables, le rendement de produits spécifiques est ainsi augmenté. L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ est une enzyme chimique à démarrage à chaud ; il n’existe donc aucun risque de contamination biologique.
Le tampon GeneAmp 10X PCR Gold est formulé pour permettre une activation flexible et efficace de l’ADN polymérase AmpliTaq Gold™, résultant en une amplification par PCR robuste et hautement spécifique. La force ionique et le pH du tampon GeneAmp™ 10X PCR Gold ont été optimisés pour fournir une température et une plage de temps d’activation plus larges lorsqu’ils sont utilisés en conjonction avec l’ADN polymérase AmpliTaq Gold™.
ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 pour des performances supérieures L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 est également disponible pour des performances PCR encore meilleures. Par rapport à l’ADN polymérase AmpliTaq Gold™, l’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 est purifiée selon un processus de séparation exclusif supplémentaire destiné à éliminer les séquences d’ADN bactérien contaminé de la préparation enzymatique. Lorsqu’elle est utilisée en combinaison avec le tampon 360 Gold Buffer, et grâce à ses capacités de démarrage à chaud, cette enzyme ultra-pure permet de réduire les faux-positifs, d’amplifier les séquences cibles à faible concentration et d’accélérer l’amplification de toute une série de modèles. Également fourni avec ce produit : une séquence activatrice 360 GC permettant d’exécuter les modèles difficiles à forte concentration en GC.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Activité exonucléasique5’ à 3’
Fidélité (par rapport à Taq)1 X
FormatTube
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
Nbre de réactions800
En surplomb3’-A
PolyméraseADN polymérase AmpliTaq Gold
Type de produitADN polymérase
Quantité1 000 unités
Format de réactionComposants séparés
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Taille (produit final)5 kb ou moins
Matériau de départADN
Concentration5 U/μl
À utiliser avec (application)Hot-start PCR
GC-Rich PCR PerformanceFaible
Vitesse de réactionÉtalon
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contenu : • 1 tube (200 µl à 5 U / µl) d’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ • 4 tubes (1,5 ml) de tampon GeneAmp™ 10X Gold (150 mM de Tris-HCl, pH 8,0, 500 mM de KCl) • 4 tubes (1,5 ml) de chlorure de magnésium 25 mM.
Conserver entre -15 et -30 °C.
Foire aux questions (FAQ)
My oligonucleotide does not appear to be the right length when I checked by gel electrophoresis. Why is this?
Oligos should be run on a polyacrylamide gel containing 7 M urea and loaded with a 50% formamide solution to avoid compressions and secondary structures. Oligos of the same length and different compositions can electrophorese differently. dC's migrate fastest, followed by dA's, dT's, and then dG's. Oligos containing N's tend to run as a blurry band and generally have a problem with secondary structure.
The primers I am using worked for PCR initially, but over time, have stopped working. What happened?
Primers should be aliquoted for single use before PCR set-up. Heat just the aliquoted primers to 94 degrees for 1 min. Quick chill the primer on ice before adding to the PCR reaction. Some primers may anneal to themselves or curl up on themselves.
I don't see a pellet in my oligo tube order. Should I ask for a replacement?
The drying method dries the primer in a thin layer along the sidewalls of the tube instead of the bottom, therefore a pellet is not always visible and should still be ready to use.
There is a ball-shaped pellet at the bottom of my oligo tube. What is this and can I still use my oligo?
If the oligo was overheated, it will appear as a ball-shaped pellet attached to the bottom of the tube. This should not affect the quality of the oligo, and the oligo should be readily soluble in water.
There is a green color in my lyophilized oligo. Can I still use it?
If an oligo appears green in color, this is most likely due to ink falling into the tube. The oligo should still be fully functional. The color can be removed by doing an ethanol precipitation.
Approaches to determine expression of inflammatory cytokines.
Authors:Amsen D, de Visser KE, Town T,
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:19347295
'There is an increasing awareness of the role of inflammation in cancer. Immune responses can limit the growth of some tumors, but paradoxically, may promote the growth of others. Cytokines are critical mediators of both the innate and the adaptive immune responses. In this chapter, we will describe several methods ... More
A phase 1 study of a vaccine targeting preferentially expressed antigen in melanoma and prostate-specific membrane antigen in patients with advanced solid tumors.
Authors:Weber JS, Vogelzang NJ, Ernstoff MS, Goodman OB, Cranmer LD, Marshall JL, Miles S, Rosario D, Diamond DC, Qiu Z, Obrocea M, Bot A,
Journal:J Immunother
PubMed ID:21760528
Preferentially expressed antigen in melanoma (PRAME) and prostate-specific membrane antigen (PSMA) are tumor-associated antigens implicated in cellular differentiation, genetic stability, and angiogenesis. MKC1106-PP is an immunotherapeutic regimen cotargeting PRAME and PSMA, comprised of a recombinant plasmid (pPRA-PSM encoding fragments derived from both antigens) and 2 peptides (E-PRA and E-PSM derived ... More