Kit de séquençage cyclique BigDye™ Terminator v1.1
Applied Biosystems™

Kit de séquençage cyclique BigDye™ Terminator v1.1

Ce kit de séquençage cyclique BigDye™ Terminator v1,1 est conçu pour les applications spécialisées nécessitant un appel de bases optimal adjacent au primaire. Il permet également le séquençage court de modèles de produits PCR avec des modules de migration à électrophorèse rapide.
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RéférenceQuantité
43374491 mL
4337450100 réactions
43374511000 réactions
43374525000 réactions
Référence 4337449
Prix (EUR)
-
Quantité:
1 mL
Ce kit de séquençage de cycle BigDye™ Terminator v1.1 est conçu pour les applications spécialisées nécessitant un appel de bases optimal adjacent à l’amorce, et pour le séquençage court de modèles de produits PCR, avec des modules de migration à électrophorèse rapide.

•Amélioration de la qualité de vos résultats sur un vaste éventail d’applications de séquençage.
•Meilleur séquençage des séquences et des modèles complexes.
• Lectures plus longues et de meilleure qualité, avec des hauteurs de pics plus uniformes et un équilibre optimal des signaux.
• Amélioration de la productivité et réduction des coûts.

Traitement des séquences difficiles
Le kit de séquençage de cycle BigDye Terminator v1.1 vous permet de disposer d’une chimie à la fois robuste et très flexible, capable de s’adapter à un vaste éventail d’applications, notamment le séquençage de novo et le reséquençage.

Hauteurs de pics plus uniformes et plus grande précision
Avec la chimie supérieure du kit BigDye Terminator v1.1, vous générez des données avec des hauteurs de pics uniformes et un équilibre du signal optimisé. Vous obtenez ainsi des lectures plus longues et de meilleure qualité.ainsi que des affectations de base plus précises pour la détection de mutations et d’hétérozygotes.

Intégration facile dans votre flux de travail
La chimie du kit BigDye™ Terminator v.1.1 ne nécessite aucun nouveau logiciel, ni aucun ré-étalonnage d’instrument. Vous pouvez intégrer un kit ou un autre à votre flux de travaux actuel, sans aucune modification majeure au niveau de vos protocoles.

Usage exclusivement réservé à la recherche.Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (application)Séquençage riche en AT (>65 %), séquençage comparé (mutations de lignée germinale - 50:50), séquençage de produits PCR courts, séquençage riche en GC (>65 %), séquençage de modèles riche en GT ou difficile, séquençage De Novo - débit faible à moyen
À utiliser avec (équipement)Analyseur génétique 310, analyseur génétique 3100, analyseur génétique 3100-Avant, analyseur génétique 3130xl, analyseur génétique 3700, ABI PRISM™ 377, GeneAmp 2700, GeneAmp 9600, GeneAmp 9700, GeneAmp™ 2400
Gamme de produitsBigDye™ Terminator
Type de produitTampon de séquençage
Quantité1 mL
TechniqueSéquençage de terminaison à colorant fluorescent
Compatibilité des modèlesBAC DNA, Plasmid DNA (≤15 Kb), PCR Amplicons, Single Stranded DNA
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Tube de 200 µL du Reaction Mix BigDye™ Terminator v1.1, tube d’amorce M13 (-21), tube d’ADN de contrôle pGEM, tube de 1 ml de tampon de séquençage 5X. Conserver le kit entre -15 et -25°C. Le tampon de séquençage BigDye™ peut être conservé à 4°C.

Foire aux questions (FAQ)

My DNA sequencing data from the capillary electrophoresis system does not look good. Why?

Capillary electrophoresis systems are complex systems, and troubleshooting data quality can be complicated. The biggest contributors to data quality can be divided into these areas: software, chemistry, and instrument performance.

Troubleshooting software
Ensure that the run module you are using and the dye set match the chemistry and instrument setup. For example, if you are running a multicapillary instrument with a 50 cm array on it, the run module should have a “50” in the name. On a multicapillary system, BigDye Terminator v3.1 should run under Dye Set Z, BigDye Terminator v1.1 chemistry should run in Dye Set E (on the ABI PRISM 310 Genetic Analyzer, both chemistries run under Filter Set E, but require different matrices for analysis). The mobility file (DyeSet/Primer) should have the correct instrument, polymer, and chemistry in the name (e.g. KB_3130_POP7_BDTv.3.mob).

Troubleshooting chemistry and instrument performance
•Sequencing Standards: validate instrument
If Sequencing Standards fail, it suggests a possible electrophoresis problem due to array, polymer, buffer, water, septa, plastics, or maybe a hardware failure such as autosampler, laser, camera, etc.

•pREF-BDT Control DNA: validate cycle sequencing and its clean-up
If the pREF-BDT control reactions fail and the Sequencing Standards pass, look into potential problems with the sequencing kit, thermal cycler, and cleanup procedure.
The pREF-BDT Control DNA and M13 (–21) primers needed to run the reactions are included with each BigDye Terminator Cycle Sequencing Kit

•Custom Internal Controls: validate PCR and its clean-up
If the Sequencing Standards and the pGEM controls passed, then look into potential problems with template quantity and quality, primers, PCR reaction and purification.

For more information on troubleshooting your data, please refer to the DNA Sequencing by Capillary Electrophoresis: Applied Biosystems Chemistry Guide: 3rd Edition, which can be downloaded from this link (https://www.thermofisher.com/us/en/home/global/forms/sanger-sequencing-guide-download-form.html).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

What are the concentrations of the pREF-BDT and M13 primer controls that come with the BigDye Terminator kits?

The concentration of the pREF-BDT control is 200 ng/µL. The concentration of the M13 primer is 0.8 pmol/µL.

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How do I determine the annealing temperature for the DNA sequencing thermal cycling conditions?



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Can I purchase the -21 M13 forward control primer from the BigDye Terminator kit separately?

We do not sell the -21 M13 forward control primer separately, however we provide the primer sequence for your convenience: TGTAAAACGACGGCCAGT

Please feel free to use our oligo services to order this primer (https://www.thermofisher.com/us/en/home/products-and-services/product-types/primers-oligos-nucleotides/invitrogen-custom-dna-oligos.html).
We also offer an -21M13 forward primer that is one basepair shorter than that contained in the kit (Cat. No. N52002).

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Can I purchase the pREF-BDT control from the BigDye Terminator kit separately?

We do not sell the pREF-BDT control separately from the DNA sequencing kit.

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