Kit de transcription inverse micro-ARN TaqMan™
Applied Biosystems™

Kit de transcription inverse micro-ARN TaqMan™

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Référence 4366597
Prix (EUR)
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Le kit de transcription inverse TaqMan™ MicroARN d’Applied Biosystems™ apporte les composants nécessaires pour 1000 réactions d’une performance optimale dans les essais biologiques TaqMan™ MicroARN. Les composants de ce kit s’utilisent avec l’amorce de transcription inverse fournie avec l’essai TaqMan™ MicroARN pour convertir l’ARNmi en ADNc.

Un kit très spécifique qui procède à l’analyse quantitative uniquement d’ARNmi matures et pas de précurseurs. Un kit sensible qui conserve les échantillons limités et ne nécessite que 1 à 10 nanogrammes d’ARN total. C’est un essai RT-PCR rapide, simple et évolutif en deux étapes qui apporte des résultats de qualité élevée en moins de trois heures.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Fidélité (par rapport à Taq)10 X
Type de produit finalADNc
Nbre de réactions1000 réactions
Température de réaction optimale42°C
Gamme de produitsTaqMan
Type de produitKit de transcription inverse des micro-ARN
Quantité1,000 reactions
Format de réactionComposants séparés
Transcriptase inverseMultiScribe™
Type d’échantillonARN
Conditions d’expéditionGlace carbonique
Taille (produit final)200 bp ou moins
Suffisant pour1000 réactions
Concentration10X
Méthode de détectionAmorce-sonde
À utiliser avec (application)Analyse de micro-ARN
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Méthode PCRRT-qPCR en 2 étape
Vitesse de réactionRapide
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Contient un tampon RT 10X, un mélange dNTP avec dTTP (100 mM au total), un inhibiteur de RNase (20 U/μl) et une enzyme RT MultiScribe™ (50 U/μl) pour 1 000 réactions. Conserver entre -15 et -25°C.

Foire aux questions (FAQ)

How long can I store the cDNA from my reverse transcription step?

You can store your cDNA at 2-6 degrees C for up to 24 hours. For long-term storage, store the cDNA at -15 to -25 degrees C and add EDTA to a final concentration of 1 mM to prevent degradation.

Can one use the reagents from High Capacity RT kit to make cDNA for TaqMan MicroRNA Assay?

Yes. You can use the reagents from the High Capacity cDNA Kit PN 4368814 (without RNAse Inhibitor) or 4374966 (with RNAse Inhibitor). Make sure to use the reverse transcription primer provided from the TaqMan miRNA assay for the reverse transcription.

Is it possible to combine several miRNA RT primers together for reverse transcription, and if so, how?

Yes. If you are using individual TaqMan MicroRNA Assays, you can prepare your own RT and PreAmp pools. Refer to Protocol for Creating Custom RT and Preamplification Pools using TaqMan MicroRNA Assays (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/4465407_CustomRT-preamp_UG.pdf) for detailed information. Although this protocol has been tested by our development group, we recommend that you validate the performance of the particular pool that you are interested in working with. At a minimum, we recommend running a No Template Control (NTC). The NTC is crucial to identify any primer interactions that may increase the background.

Why does the TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit (4366597) protocol have an initial 16 degree C step before the reverse transcription step at 42 degrees C?

The 30 min incubation at 16°C allows the RT primer to anneal to miRNA template properly. See the complete protocol at this link.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What concentration of cDNA or range do we recommend for miRNA assays when using the TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit (Cat. No. 4366596)?

1-10 ng of total RNA.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.