Le kit de purification BigDye XTerminator™ est une méthode de purification simple et rapide pour les réactions de séquençage d’ADN qui élimine les sels et les terminateurs BigDye™ non incorporés.Fini les taches de colorants !Le nettoyage est complet en moins de 40 minutes et demande moins de 10 minutes de travail.

•Éliminez le transfert de liquide – utilisez une seule plaque
•Obtenez l’élimination totale des taches de colorants.
•Stabilisez les échantillons avant analyse.
•Améliorez vos flux de travaux liés au séquençage.
• Exécutez des protocoles manuels ou automatisés.
• Parvenez rapidement à des résultats fiables et reproductibles.

Procédé de purification simple
Les méthodes traditionnelles de purification, telles que la précipitation à l’aide d’éthanol, nécessitent l’ajout de nombreux réactifs avec des étapes de décantation et de centrifugation.Le kit de purification BigDye XTerminator™ ne nécessite l’ajout que de deux réactifs qui peuvent être soit incorporés de façon séquentielle soit pré-mélangés :

• Solution XTerminator™ : récupère les terminateurs de colorants non incorporés et les sels libres de la réaction post-séquençage.
• Solution SAM™ : optimise la performance de la solution Xterminator™ et stabilise les réactions de post-purification.

Le protocole est très simple (voir figure 1) :
1.Exécutez le séquençage des cycles avec les terminateurs BigDye™.
2.Après les cycles de séquençage, centrifugez brièvement la plaque de réaction, puis pipetez le bon volume de solution SAM™ dans chaque puits de la plaque.
3.Pipetez le bon volume de solution XTerminator™ dans chaque puits :
4.Vortexez brièvement le conteneur vrac de la solution XTerminator™.
5.À l’aide d’une pipette large (embouts larges recommandés), pipetez le bon volume de liquide dans chaque puits de la plaque
6.Scellez la plaque à l’aide d’un thermo-scellage ou d’un film adhésif transparent (P⁄N 4306311).Agitez au mélangeur vortex pendant 30 minutes (nous recommandons les agitateurs-mélangeurs vortex pour microplaques de 96 puits et les agitateurs-mélangeurs vortex pour microplaques de 384 puits), puis centrifugez brièvement la plaque de réaction.
7.Placez la plaque de réaction dans l’analyseur d’ADN Applied Biosystems.Sélectionnez le module et la plaque d’exécution.

Excellente récupération des fragments longs
Vous n’aurez pas à sacrifier la longueur de la séquence quand vous utiliserez le kit de purification BigDye XTerminator™.La figure 2 montre les données fournies par l’Unité de technologie d’analyse de l’ADN, Plant Biotechnology Institute (NRC-PBI) Saskatoon, Canada.Résultat de la base Q20 =1044 bp.

Récupération des fragments courts améliorée
Utilisez le kit de purification BigDye Xterminator™ pour obtenir des données de meilleure qualité.La figure 3 montre une comparaison entre le kit de purification BigDye XTerminator™ et la purification à base d’éthanol précipité réalisée à l’Unité de technologie d’analyse de l’ADN, Plant Biotechnology Institute (NRC-PBI) Saskatoon, Canada.Le kit de purification BigDye XTerminator™ démontre une récupération supérieure des fragments courts.La purification à l’éthanol produit des données de séquençage tachées par les colorants.

Stabilité accrue
Les plaques de réaction scellées sont stables pendant 48 heures à température ambiante ou 10 jours à 4°C. Vous pouvez réutiliser les mêmes échantillons en cas de coupure de courant, de dysfonctionnement informatique, etc. sans avoir à répéter l’expérience.Cela augmente votre liberté d’action lorsque vous chargez une plaque de réaction sur un instrument CE.

Modules d’exécution disponibles
Applied Biosystems fournit des modules téléchargeables à utiliser avec le kit de purification BigDye XTerminator™ et le logiciel de collecte de données.Ces modules sont conçus pour les analyseurs 3100, 3100–Avant (avec collecte de données v2.0 ou ultérieure), 3130⁄3130xl et 3730⁄3730xl.Les modules logiciels pour le kit de purification BigDye XTerminator™ sont compatibles avec les systèmes d’exploitation Windows™ 2000 et Windows™ XP et sont disponibles sur notre page de téléchargement de logiciels :

Applied Biosystems Integrated Systems pour l’analyse génétique ›

Usage exclusivement réservé à la recherche.Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.