AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Reagents
Applied Biosystems™

AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Reagents

Les réactifs de RT-PCR en une étape AgPath-ID™ sont conçus pour l’amplification sensible et solide des ARN cibles à l’aide d’une stratégie de PCR à transcription inverse (RT-PCR) en temps réel TaqMan™ rapide suivant une configuration à tube unique.
Have Questions?
Modifier l'affichagebuttonViewtableView
RéférenceNbre de réactions
43873911000 réactions
AM1005100 réactions
4387424500 réactions
Référence 4387391
Prix (EUR)
2 060,00
Each
Nbre de réactions:
1000 réactions
Prix (EUR)
2 060,00
Each

AgPath-ID™ One-Step RT-PCR Reagents are designed for sensitive, robust amplification of RNA targets using a rapid single-tube TaqMan™ real-time reverse transcription PCR (RT-PCR) strategy.

Les réactifs de RT-PCR en une étape AgPath-ID™ sont conçus pour l’amplification sensible et solide des ARN cibles à l’aide d’une stratégie de PCR à transcription inverse (RT-PCR) en temps réel TaqMan™ rapide suivant une configuration à tube unique.
  • Recommandé pour l’amplification des agents pathogènes de l’ARN.
  • Amplification homogène des ARN cibles de haute précision et avec une grande sensibilité.
  • Optimisé pour un fonctionnement avec vos amorces et sondes spécifiques à une cible.
  • Teneur en ROX pour la normalisation quantitative des signaux fluorescents.

    Les réactifs de RT-PCR en une étape AgPath-ID™ sont configurés pour permettre une mise en œuvre simple et rapide des réactions. Les réactions sont assemblées au sein d’un même tube, limitant ainsi le risque d’erreurs de manipulation des échantillons, tout en accélérant le temps nécessaire à la configuration. Une fois cet assemblage terminé, les résultats sont disponibles dans un délai d’une heure environ. Le mélange d’enzymes 25X de RT-PCR compris dans le kit contient de la transcriptase inverse ArrayScript™ hautement efficace, de la transcriptase inverse mutante du M-MLV à fort rendement d’ADNc, ainsi que de la polymérase AmpliTaq Gold™, l’ADN polymérase d’activation à chaud de prédilection pour l’amplification de cible spécifique. Le tampon 2X de RT-PCR a été optimisé pour une transcription inverse solide et efficace ; le colorant de référence passive ROX™ est intégré au processus de PCR à des fins de normalisation quantitative des signaux fluorescents. Une séquence activatrice de détection est également fournie ; elle sert de réactif facultatif pour l’amplification des modèles à concentration élevée en GC ou structure secondaire persistante.
  • Pour usage vétérinaire uniquement.
    Spécifications
    DescriptionWorks on all AB platforms, but is optimized for the 7500.
    Fidélité (par rapport à Taq)25 X
    À utiliser avec (équipement)7500 System, 7500 Fast System, 7900HT System, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7 Flex, QuantStudio 6 Pro, QuantStudio 7 Pro, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ Absolute Q Digital PCR System
    FormatTube
    Nbre de réactions1000 réactions
    Colorant de référence passiveROX (pré-mélangé)
    PolyméraseADN polymérase AmpliTaq Gold
    Gamme de produitsAgPath-ID, Ambion
    Type de produitRéactif de RT-PCR en une étape
    Quantité1,000 reactions
    Transcriptase inverseArrayScript™
    Type d’échantillonARN
    Conditions d’expéditionDry Ice
    Suffisant pour1000 réactions
    Volume14 mL
    Concentration25 X
    Méthode de détectionAmorce-sonde
    GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
    Méthode PCRqRT-PCR en une étape
    Vitesse de réactionÉtalon
    Unit SizeEach
    Contenu et stockage
    Sufficient for 1000 reactions of 25 μL, contains:
    • 14 mL 2X RT-PCR Buffer
    • 1100 μL 25X RT-PCR Enzyme Mix
    • 25 mL Nuclease-free Water.

    Foire aux questions (FAQ)

    With the AgPath-ID One-Step RT-PCR Reagents, I am getting signal detection in the no-template control (NTC) reaction. Why is this?

    This is likely due to PCR contamination. Here are some recommendations:

    - Repeat the qRT-PCR reaction with fresh reagents and decontaminated pipettors.
    - Set up and run the qRT-PCR reaction in an area that is isolated from areas used for nucleic acid isolation and PCR product analysis.
    - The Reverse Transcriptase enzyme contained in this kit is produced using an E. coli expression vector containing a proprietary version of the MMLV pol gene (GenBank accession no. J02255) expressed from pET-24(+). It is possible that a minimal amount of the expression vector could be carried over into the final mastermix formulation. If you are targeting MMLV, a related virus, or any of the plasmid sequence, we recommend designing primer sequences for target sequences not contained in the expression vector.

    What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

    If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

    - Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
    - Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
    - Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
    - Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

    How do I set the baseline for my qPCR experiment?

    Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

    How do I set the threshold for my qPCR experiment?

    In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

    I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

    There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.