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Applied Biosystems™

Kit en 1 étape TaqMan™ RNA-to-CT

Le kit Applied Biosystems TaqMan RNA-to-CT 1-Step offre une évaluation quantitative homogène de cibles ARN pour un large éventail deAfficher plus
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Référence 4392653
Prix (EUR)
339,00
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Prix (EUR)
339,00
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Le kit Applied Biosystems TaqMan RNA-to-CT 1-Step offre une évaluation quantitative homogène de cibles ARN pour un large éventail de dosages ; il est validé avec la bibliothèque complète Applied Biosystems de dosages d’expression génétique TaqMan.Le kit est recommandé pour diverses applications, notamment des études d’expression génétique générales, la recherche de marqueurs biologiques et la validation de microarray.

Les caractéristiques du kit TaqMan RNA-to-CT 1-Step sont les suivantes :
•Précis sur une large échelle dynamique pour des performances fiables
• Validé avec les dosages d’expression génétique TaqMan pour une configuration expérimentale facile
• Des performances homogènes avec un large éventail de cibles, notamment des séquences riches en AT, riches en GC et longues
• Format en 1 étape signifiant moins d’étapes de pipetage, ce qui réduit le risque d’erreurs

Efficace sur un large éventail de concentrations d’entrée
Une flexibilité maximale dans la quantité d’entrée du modèle ARN nécessite une efficacité PCR en temps réel optimale pour une large gamme de quantités de modèles.La figure 1 montre l’excellente efficacité d’amplification sur six ordres de grandeur.Le résultat est comparable à celui du kit en 2 étapes TaqMan RNA-to-CT et représente une amélioration significative de l’échelle dynamique et de la sensibilité par rapport aux réactifs du Master Mix de RT-PCR TaqMan One-Step.

Une sensibilité élevée à une faible concentration de cibles
La sensibilité du kit TaqMan RNA-to-CT 1-Step a été validée en utilisant un modèle d’ARN synthétique pour lequel le nombre de copies est connu avec précision.Une erreur d’échantillonnage importante se produit lorsque l’on mesure de faibles quantités d’une cible ; une analyse statistique est donc requise pour une évaluation correcte en utilisant plusieurs répétitions.La figure 2 montre la quantité de cible attendue et les valeurs de CT moyennes correspondantes.L’analyse statistique indique une confiance élevée en termes d’évaluation quantitative des échantillons, basée sur un test T (tableau I), homogène avec seulement 10 copies de la cible*.

Les résultats dépendent d’une variété de facteurs, y compris la conception des dosages.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
À utiliser avec (équipement)7000 System, 7300 System, 7500 System, 7700 System, 7900HT System, Applied Biosystems StepOnePlus™ Fast Real-Time PCR System, StepOne™, Standard Mode, StepOnePlus™, Standard Mode
Nbre de réactions40 réactions
Colorant de référence passiveROX (pré-mélangé)
PolyméraseADN polymérase AmpliTaq Gold
Gamme de produitsRNA-to-CT, TaqMan
Type de produitKits de RT-PCR en une étape
Pureté ou qualitéUP (Ultra Pure)
Quantité40 reactions
Transcriptase inverseArrayScript™ UP
Type d’échantillonARN
Conditions d’expéditionGlace humide
Suffisant pour40 réactions
Méthode de détectionAmorce-sonde
À utiliser avec (application)Expression génétique
Méthode PCRRT-qPCR en 1 étape
Vitesse de réactionÉtalon
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Suffisant pour 40 réactions à un volume de réaction de 50 µl. Inclut :
• 1 tube de 1 ml de Master Mix 2X contenant de l’ADN polymérase UP AmpliTaq Gold™, des dNTP (y compris dUTP), la référence passive 1 et des composants tampon optimisés. Conserver entre -15 et -25°C.
• 1 tube de 50 µl de mélange enzymatique 40X RT contenant de la transcriptase inverse UP ArrayScript™, un inhibiteur de RNase. Conserver entre -15° et -30°C.

La durée de conservation minimale garantie est de 60 jours (date de péremption exacte imprimée sur le produit et le certificat d’analyse).

Foire aux questions (FAQ)

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.