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4398881
5 mL
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1 mL
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Le mélange PCR AmpliTaq Gold™ 360 Master Mix contient tout ce dont vous avez besoin pour une amplification par PCR réussie dans un emballage pratique unique. Tous les composants sont pré-mélangés et pré-mesurés. Le mélange AmpliTaq Gold™ 360 Master Mix a été conçu pour assurer la couverture 360° d’une vaste gamme de cibles. Le mélange maître est fourni à une concentration d’utilisation recommandée deux fois plus élevée pour une dilution aisée lors de l’ajout du modèle et des amorces. Pratique, le mélange PCR AmpliTaq Gold™ 360 Master Mix s’adapte à divers volumes de réaction pour une application et une souplesse de format supérieures. L’ingrédient principal du mélange Master Mix est l’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360, mais il contient également la séquence activatrice 360 GC de classe mondiale, qui peut être éventuellement ajoutée pour les modèles à teneur élevée en GC. Grâce à sa couverture de modèle étendue, l’optimisation des conditions de réaction PCR est pratiquement éliminée avec l’utilisation du mélange AmpliTaq Gold™ 360 Master Mix. Caractéristiques principales :
• Optimisé pour la gamme la plus large de cibles : du quotidien au difficile • Sensibilité, spécificité et rendement inégalés • Amplification robuste des séquences riches en GC avec l’activateur 360 GC leader sur le marché • Atteint les données de séquençage de la plus haute qualité • Mélange Master Mix pré-mélangé et facile à utiliser
Optimisé pour des cibles faciles et difficiles Les cibles difficiles comprennent les amplicons riches en AT, en GC, les amplicons formant des amorces dimères, les répétitions d’homopolymères et les amplicons qui posent des problèmes de séquençage. Les amplicons qui exigeaient auparavant des enzymes et des conditions de réaction spécialisés peuvent désormais être amplifiés de manière reproductible avec un seul réactif dans des conditions normalisées (voir figure). L’analyse comparative compétitive sur plus de 40 amplicons distingue AmpliTaq Gold™ 360 comme l’enzyme la plus performante, garantissant ainsi la plus grande probabilité de succès pour l’amplification des cibles quotidiennes et difficiles (voir tableau).
Optimisé pour la PCR automatisée à démarrage à chaud L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 est l’ingrédient clé d’une PCR automatisée, pratique et efficace à démarrage à chaud. Lorsque le mélange AmpliTaq Gold™ 360 PCR Master Mix est ajouté au mélange de réaction à température ambiante, l’enzyme inactif est incapable d’étendre l’amorce. Toutes les erreurs d’amorçage de faible gravité susceptibles de s’être produites ne seront pas étendues de façon enzymatique et ultérieurement amplifiées. Une étape d’incubation thermique initiale est nécessaire pour l’activation et assure que l’enzyme active est uniquement générée à des températures auxquelles l’ADN est entièrement dénaturé. La quantité d’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 augmente dans la réaction lentement avec chaque numéro de cycle, et le rendement de produits spécifiques augmente sans accumulation des produits non spécifiques, notamment des dimères d’amorces. Excellente spécificité sur une vaste gamme de cibles (voir figure). La spécificité extrême facilite le multiplexage et la discrimination allélique.
Amplifiez les amplicons à faible copie et les cibles longues L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 amplifie efficacement les cibles présentes à faible nombre de copies (voir figure), même en présence de fortes concentrations d’ADN complexe, ce qui la rend particulièrement adaptée à la détection des agents pathogènes à faible copie et à l’amplification de cibles à partir d’échantillons d’ADN dégradés. L’extrême pureté de l’enzyme contribue à sa sensibilité inégalée. L’ADN polymérase AmpliTaq Gold™ 360 amplifie de façon efficace et reproductible les longues séquences (jusqu’à 5 kb). La figure illustre l’amplification de PCR robuste de longues séquences d’ADN humain et plasmidique.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Activité exonucléasique5’ à 3’
Fidélité (par rapport à Taq)1 X
FormatTube
Hot StartFonctionnalité Hot-Start (démarrage à chaud) intégrée
Nbre de réactions200 réactions
En surplomb3’-A
PolyméraseADN polymérase AmpliTaq Gold 360
Type de produitMaster Mix de PCR
Quantité5 mL
Format de réactionSuperMix ou Master Mix
Conditions d’expéditionHomologué pour des expéditions à température ambiante ou sur glace mouillée
Taille (produit final)5 kb ou moins
Matériau de départADN
Volume5 mL
Concentration2X
À utiliser avec (application)Clonage, Hot-start PCR
GC-Rich PCR PerformanceÉlevé
Vitesse de réactionÉtalon
Unit SizeEach
Contenu et stockage
• 1 x 5 ml de Master Mix AmpliTaq Gold 360 2X • 1 x 1,5 ml de séquence activatrice 360 GC
Conserver à -20°C jusqu’à la première utilisation, puis à 4°C.
Foire aux questions (FAQ)
My oligonucleotide does not appear to be the right length when I checked by gel electrophoresis. Why is this?
Oligos should be run on a polyacrylamide gel containing 7 M urea and loaded with a 50% formamide solution to avoid compressions and secondary structures. Oligos of the same length and different compositions can electrophorese differently. dC's migrate fastest, followed by dA's, dT's, and then dG's. Oligos containing N's tend to run as a blurry band and generally have a problem with secondary structure.
The primers I am using worked for PCR initially, but over time, have stopped working. What happened?
Primers should be aliquoted for single use before PCR set-up. Heat just the aliquoted primers to 94 degrees for 1 min. Quick chill the primer on ice before adding to the PCR reaction. Some primers may anneal to themselves or curl up on themselves.
I don't see a pellet in my oligo tube order. Should I ask for a replacement?
The drying method dries the primer in a thin layer along the sidewalls of the tube instead of the bottom, therefore a pellet is not always visible and should still be ready to use.
There is a ball-shaped pellet at the bottom of my oligo tube. What is this and can I still use my oligo?
If the oligo was overheated, it will appear as a ball-shaped pellet attached to the bottom of the tube. This should not affect the quality of the oligo, and the oligo should be readily soluble in water.
There is a green color in my lyophilized oligo. Can I still use it?
If an oligo appears green in color, this is most likely due to ink falling into the tube. The oligo should still be fully functional. The color can be removed by doing an ethanol precipitation.
Identification of rodent homologs of hepatitis C virus and pegiviruses.
Authors:Kapoor A, Simmonds P, Scheel TK, Hjelle B, Cullen JM, Burbelo PD, Chauhan LV, Duraisamy R, Sanchez Leon M, Jain K, Vandegrift KJ, Calisher CH, Rice CM, Lipkin WI,
Journal:MBio
PubMed ID:23572554
Hepatitis C virus (HCV) and human pegivirus (HPgV or GB virus C) are globally distributed and infect 2 to 5% of the human population. The lack of tractable-animal models for these viruses, in particular for HCV, has hampered the study of infection, transmission, virulence, immunity, and pathogenesis. To address this ... More