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Ion Torrent™

Ion AmpliSeq™ Cancer Hotspot Panel v2

Le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 est un groupe unique d’amorces permettant d’effectuer la PCR multiplexe en vue de préparerAfficher plus
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Référence 4475346
Prix (EUR)
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Le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 est un groupe unique d’amorces permettant d’effectuer la PCR multiplexe en vue de préparer des bibliothèques d’amplicons à partir de régions “hot spot” génomiques faisant fréquemment l’objet de mutations dans les gènes du cancer chez l’humain (télécharger la liste des gènes ciblés et des mutations pour le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2). Au-delà des mutations incluses dans le panel initial Ion AmpliSeq™Cancer, le dernier panel Ion AmpliSeq™ prêt à l’emploi offre ce qui suit :
• Compatibilité maintenue avec des échantillons FFPE tout en agrandissant le contenu mutationnel pour une couverture élargie de gènes supplémentaires et de mutations “hot spot”
• Couverture extrêmement uniforme pour un séquençage plus efficace et une réduction des coûts
• Conception de l’amorce améliorée, avec une optimisation des nouveaux ensembles d’amorces et une corrélation de brin encore plus faible pour stimuler la confiance liée aux classifications de variantes précises
• Meilleure détection des variantes avec le logiciel Torrent Suite v3.0 et le plug-in de classifications de variantes lors de la détection des variantes de l’allèle faible et sensibilité améliorée à l’indel

Contenu mutationnel supplémentaire pour faire progresser les études de recherche sur le cancer
Le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 a été conçu pour amplifier 207 amplicons couvrant environ 2 800 mutations COSMIC à partir de 50 oncogènes et gènes suppresseurs de tumeurs. Cela englobe 739 mutations COSMIC à partir de 46 gènes dans le premier panel Ion AmpliSeq™Cancer avec des mutations hotspot supplémentaires provenant de gènes importants du cancer. Tout en conservant la compatibilité avec les échantillons FFPE et en couvrant les mêmes cibles que le premier panel Ion AmpliSeq™Cancer, nous avons inclus des mutations supplémentaires en ajoutant plusieurs amplicons pour les hotspots dans EZH2, GNA11, GNAQ et IDH2, et en ajoutant des amplicons légèrement plus longs pour les autres gènes afin de faire progresser vos recherches sur le cancer. Le panneau Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 doit être utilisé avec le kit de bibliothèque Ion AmpliSeq™Library Kit 2.0.

Séquençage plus efficace et plus rentable avec une couverture extrêmement uniforme
Le design amélioré de l’amorce dans le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 améliore l’uniformité de couverture de la technologie Ion AmpliSeq™. Grâce à une couverture plus uniforme, une profondeur minimale sur tous les amplicons est réalisable en utilisant un débit de séquençage nettement inférieur. Par conséquent, des échantillons supplémentaires peuvent être multiplexés à l’aide de puces ioniques. Cela se solde par des économies de coûts, avec un séquençage plus efficace, tout en conservant une confiance élevée des classifications de variantes. Qui plus est, la faible corrélation de brin dans les ensembles d’amorces du panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 stimule la confiance liée aux classifications de variantes précises.

Simplicité, vitesse et évolutivitéde la technologie Ion AmpliSeq™
En favorisant la simplicité de la technologie Ion AmpliSeq™, le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 encourage les études génétiques sur le cancer avec des tissus FFPE et seulement 10 ng d’ADN entrant pour créer une bibliothèque ciblée. Le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 gère également ce flux de travaux révolutionnaire en utilisant les équipements standard de la PCR et une simple réaction de PCR pour sélectionner la cible PCR multiplexe ultra élevée, sans recourir à un vaste programme d’investissement en capitaux. Qui plus est, le panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2 optimise votre vitesse d’accès aux bibliothèques ciblées en 3,5 heures environ. L’évolutivité et la flexibilité sont également préservées grâce au panel Ion AmpliSeq™Cancer Hotspot v2, ce qui permet le séquençage d’un échantillon unique ou d’échantillons multiplexés à code-barres à l’aide de puces ioniques.

Meilleure détection des variantes avec le logiciel Torrent Suite v3.0
Le logiciel Torrent Suite intuitif et le plug-in de classifications de variantes vous permettent de passer de l’ADN extrait aux classifications de variantes en à peine 10 heures. Grâce aux algorithmes améliorés, vous constaterez une détection plus sensible de l’indel et de SNP avec des allèles de fréquence plus faible. Le logiciel Ion Reporter™ peut alors être utilisé pour annoter les variantes dans les dosages d’ADN de routine afin de faire progresser la recherche clinique.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

Spécifications
À utiliser avec (application)Séquençage
À utiliser avec (équipement)Ion PGM™ System
BibliothèquesBibliothèque de séquençage ciblé
Capacité multiplex207 amplicons
Nbre de réactions8
Gamme de produitsIon AmpliSeq
Type de produitCancer Hotspot Panel
Quantité8 Reactions
Type d’échantillonBlood, Blood, Cell Cultures, Clinical Samples, DNA (Genomic), DNA from FFPE, dsDNA, Fine Needle Aspirates (FNA), FFPE, Whole Blood
EspècesHuman
Quantité de matériel de démarrage10 ng DNA
TechniqueAmplicon Sequencing, Post-Light™ Ion Semiconductor Sequencing
Étape du flux de travailTarget Selection
Sequencing TypeSéquençage du génome et de l’ADN
Unit SizeEach
Contenu et stockage
1 tube. Store at -30 to -10 °C

Foire aux questions (FAQ)

What is the difference between a DNA fragment library and a DNA amplicon library?

A DNA fragment library is constructed from whole genomic DNA and is commonly used for whole genome resequencing or de novo sequencing. Briefly, the whole genomic DNA is fragmented or sheared, ligated with Ion-specific adapter sequences, and then size-selected for the library fragments of the desired length.

Amplicon libraries are constructed from PCR-amplified DNA fragments and are used for targeted sequencing (e.g., investigating variants at known genomic locations). There are two types of amplicon libraries, short and long.

A short amplicon library contains DNA fragments (targets) with lengths that are compatible with the Ion template preparation kits without any further shearing or fragmentation during library preparation. Additionally, no size-selection step is required, as the amplicons are already within the desired size range.

A long amplicon library contains DNA fragments (targets) with lengths that are longer than those compatible with the Ion template kits and requires further shearing or fragmentation during library preparation. The library preparation protocol for long amplicons is similar to fragment libraries.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Next-Generation Sequencing Support Center.

Is the Ion Library Equalizer Kit compatible with Ion Ampliseq libraries?

The Ion Library Equalizer Kit (Cat. No. 4482298) is recommended for use with Ion AmpliSeq libraries and provides an alternative to library quantification methods by using bead-based technology to normalize the final library concentration to ~100 pM.

The Ion Library Equalizer Kit is fast and cost-effective compared to traditional quantification methods; however, it may be not be the right choice for all users. Briefly, the library is amplified with the Ion Equalizer Primers, captured onto Equalizer Beads, and the normalized library is eluted from the beads using a specially formulated Equalizer Elution Buffer. The final library is normalized to ~100 pM, but there is no quality control information (e.g., measured concentration or size distribution) that can be obtained, which is possible if using the recommended library quantification kits: Ion Library Quantitation Kit (qPCR), Qubit dsDNA HS Assay Kit (Qubit 2.0 Fluorometer), or Agilent High Sensitivity DNA Kit (Agilent Bioanalyzer instrument).

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What mutations are targeted in the Ion AmpliSeq Ready-to-Use and Community panels?

Detailed information regarding the variants targeted for each of the panels can be found at www.ampliseq.com. Under the Panels tab, find your panel of interest and press the “Download panel files” buttons. The ZIP archive will contain CSV files that include links to the COSMIC entries for each mutation on the cancer-related panels.

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My custom design has low predicted coverage, what can I do to improve it?

If you've reviewed your design and are not satisfied with the results, please click on the “Not happy with this design? Let us help” link to have an Ion Ampliseq team member contact you about additional options for your design.

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How do I get started with the Ion AmpliSeq Designer?

Please visit the Ion AmpliSeq Designer website (www.ampliseq.com) and log in with your Thermofisher username and password. Select the “Help” tab to review training videos and documentation, including pipeline details, troubleshooting guides, and frequently asked questions.

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