Le kit d’immobilisation AminoLink contient de la résine de couplage AminoLink et les réactifs associés suffisants pour effectuer 5 immobilisations protéiques, avec un rendement prévu de 2 à 20 mg de protéines par colonne.La résine de couplage AminoLink est une agarose à microbilles réticulée à 4 % qui a été activée avec des groupes aldéhyde pour permettre l’immobilisation covalente d’anticorps et d’autres protéines par le biais d’amines primaires.
Caractéristiques de la résine de couplage AminoLink :
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Résine de couplage AminoLink : 4 % d’agarose en microbilles réticulée activée à l’aldéhyde.
• Idéal pour les anticorps et autres protéines : qui immobilisent les molécules via les amines primaires (-NH2)
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Conditions de couplage flexibles : couplage efficace (> 85 %) sur une large gamme de pH (4-10) et de conditions de tampon (PBS ou autre tampon non amine avec ou sans solvant organique)
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Une immobilisation stable et permanente : la réaction de couplage entraîne une liaison d’amine secondaire stable et anti-fuite entre la résine et le ligand
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Mieux que l’immobilisation à l’agarose activée par CNBr : la liaison est plus stable et non chargée, ce qui entraîne moins de liaisons non spécifiques dans les procédures de purification par affinité
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Polyvalente et réutilisable : la résine d’affinité préparée est adaptable aux techniques d’affinité de colonnes et de lots et la résine est réutilisable pour les applications typiques basées sur les interactions de liaison protéique
Les protéines et autres molécules avec des amines primaires peuvent être associées de manière covalente (immobilisées) à la résine AminoLink pour faire des colonnes de chromatographie à utiliser dans la purification par affinité.Les groupes d’aldéhyde forment des liaisons d’amines secondaires stables avec des amines primaires telles qu’elles existent dans la chaîne latérale des résidus de lysine (K), qui sont généralement abondantes et facilement accessibles dans les protéines.Une fois qu’une protéine est immobilisée, la résine d’affinité préparée peut être utilisée pour de nombreuses méthodes de purification par affinité de lots et de colonnes impliquant des interactions de liaison avec la protéine immobilisée.La résine et la liaison sont stables dans la majorité des conditions de liaison et d’élution généralement utilisées dans la chromatographie d’affinité, ce qui permet à la résine préparée d’être utilisée pour plusieurs cycles de procédures de purification par affinité.
La réaction d’immobilisation de la résine AminoLink implique la formation spontanée de liaisons de base Schiff entre les aldéhydes et les amines et leur stabilisation subséquente par incubation avec un réducteur doux.Toute la réaction de couplage, appelée
amination réductrice, se produit entre 4 à 6 heures dans des tampons simples non amines tels que le PBS.L’efficacité du couplage avec les anticorps et les protéines typiques est généralement supérieure à 85 %, produisant entre 1 et 20 mg de protéines immobilisées par millilitre de résine.
Produits connexesRésine de couplage AminoLink™Réducteur AminoLink™Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.