Kit TOPO™ TA Cloning™ pour séquençage, sans cellules compétentes

Les kits TOPO® TA Cloning® pour le séquençage offrent une réaction de clonage très efficace en 5 minutes pour l’insertion directe de produits de PCR amplifiés par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique à des fins de séquençage. Chaque kit utilise le vecteur pCR4-TOPO® TA avec des sites d’amorce de séquençage spécifiquement conçus, qui permettent, pour chaque réaction, d’augmenter la séquence d’insert et de réduire celle de vecteur. Selon vos besoins et votre budget, ces kits peuvent comporter tout un éventail de cellules compétentes, ou aucune de ces cellules. Ces kits incluent les outils nécessaires pour cloner et sélectionner les vecteurs recombinants contenant le fragment de PCR de votre choix.

• Obtenez plus de—séquences séquentielles pour une séquence d'insertion plus importante et moins de séquences vectorielles lors de l'utilisation d'amorces de séquençage standard
• Fast et d'as—ygo de PCR aux clones en seulement 3 étapes, Incluant une réaction de clonage de cinq minutes
• Efficien—tprocurez jusqu'à 95 % de clones avec insert correct
• Prove—nActivation de performances fiables pendant plus d'une décennie avec plus de 20 000 citations

SpCR4-TOPO® TA Vector—Optimisé pour le séquençage
Le™® vecteur TA PCR 4-TOPO a un site de clonage multiple réduit et, par conséquent, Une distance plus courte entre les sites d'amorce de séquençage et le site d'insertion (aussi faible que 33 bp). Les réactions de séquençage produisent ainsi moins de séquence de vecteur et plus de séquence d’insert. Le vecteur TA pCR4-TOPO® comprend des sites pour 4 amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.

pCR™4-TOPO® TA Clone Selection and Manipulation
Le vecteur PCR™4-TOPO® TA contient à la fois des Marquages de résistance à l'ampicilline et à la kanamycine et unefusion de gènes LacZ α-ccdB pour la sélection positive et le sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoR I de flanquement pour l’excision simplifiée de produits de PCR clonés ainsi qu’un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les promoteurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.

Clonage simplifié basé sur TOPO®
Grâce à la technologie de clonage TOPO®, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Ajoutez simplement votre réaction PCR directement au vecteur chargé de topoisomérase fourni, laissez incuber cinq minutes et transformez E. coli.

Clonage efficace
Avec jusqu'à 95 % des clones porteurs de l'insert souhaité, vous pouvez filtrer moins de clones et gagner du temps et de l'argent. ™® Le vecteur PCR 4-TOPO TA utilisé dans ce kit est livré avec des´surpendus de 3 T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés par Taq, qui contiennent des´surpendus de 3 A.

Le kit de clonage le plus largement utilisé
En matière de clonage,® la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple d’utilisation et efficace, le clonage TOPO® a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.

Options de kit : Les kits TOPO® TA Cloning® pour le séquençage
Les kits TOPO® TA Cloning® pour le séquençage peuvent être achetés avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages en fonction de vos besoins :
• Clonage général : TOP10 (No de catalogue K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Clonage haute efficacité : Cellules TOP10 Electrocomp™ (No de catalogue K4580-01, K4580-40)
• Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5α-T1R (No de catalogue K4595-01, K4595-40)
• Croissance rapide : E. Coli chimiquement compétent Mach1™-T1R (No de catalogue K4530-20)
• Fournissez vos propres cellules (No de 450071, 450030)

Nous proposons également une version du kit qui inclut un kit de minipréparation d’ADN plasmidique rapide PureLink® (No de catalogue K4575-02) à utiliser pour l’isolement de plasmide recombinant propre et prêt pour le séquençage.