Le réactif de Marfey (FDAA) Thermo Scientific Pierce réagit avec les amines primaires pour permettre la séparation et la quantification rapides et faciles des isomères optiques des acides aminés par chromatographie en phase inverse.

Caractéristiques du réactif de Marfey (FDAA) :

• Pour la dérivatisation sur précolonne des amines primaires pour la détection par absorbance UV (λmax = 340 nm)
• Fournit une sensibilité aux nanomoles dans les applications HPLC typiques avec des acides aminés
•Les produits de réaction permettent la séparation chirale des acides aminés D et L
• Après une HPLC en phase inverse, les dérivés ont un coefficient d’extinction de 3 x 10^4M-1 cm-1

Le FDAA est un amide 1-fluoro-2-4-dinitrophényl-5-L-alanine, également appelé réactif de Marfey. Le composé réagit avec les amines primaires et il est utilisé comme réactif de dérivatisation pour la détection UV dans les méthodes de chromatographie liquide. Le réactif permet une détection à 340 nm avec une sensibilité aux nanomoles. Les dérivés FDAA des acides aminés D présentent une forte liaison intramoléculaire, ce qui réduit leur polarité par rapport aux dérivés d’acides aminés L correspondants. Par conséquent, les dérivés D sont retenus de manière sélective sur les colonnes de phase inverse et s’éluent beaucoup plus tard que les dérivés L correspondants.

Propriétés du réactif :
• Noms alternatifs : FDAA, réactif de Marfey
• Nom chimique : amide 1-fluoro-2-4-dinitrophényl-5-L-alanine ; N2-(5-fluoro-2,4-dinitrophényl)-L-alaninamide
• Réactif envers : Amines primaires (—NH2)
• Formule chimique : C9H9FN4O5
• Numéro CAS : 95713-52-3
• Poids moléculaire : 272,19
• Forme : les cristaux ou poudres jaunes ou orange brillants, exempts de particules

Les dérivés FDAA peuvent être séparés par un simple gradient linéaire de phosphate de triéthylamine/acétonitrile sur une colonne à cartouche HPLC Spheri-5 RP-18. Le FDAA réduit le besoin d’avoir une colonne chirale, car les dérivés D sont retenus sur la colonne, avec une élution après les dérivés L. La dérivatisation est facile à réaliser et s’effectue en 90 minutes, ce qui se traduit par des dérivés stables pendant au moins 48 heures.