Pierce™ Streptavidin Plus UltraLink™ Resin

Les cartouches de chromatographie de streptavidine haute capacité Thermo Scientific™ Pierce™ sont des dispositifs pratiques et prêts à l’emploi pour la séparation des molécules biotinylées des molécules non biotinylées et pour la purification des antigènes à l’aide d’anticorps biotinylés. Les cartouches de chromatographie contiennent une résine en microbilles de protéine streptavidine recombinante immobilisée qui lie les protéines biotinylées à plus de 10 mg/ml de microbilles. Cela correspond à une capacité de liaison de la biotine 2 à 3 fois plus élevée que les produits d’autres fournisseurs et est idéal lorsqu’une quantité élevée de récupération est nécessaire.

Ces cartouches permettent des séparations chromatographiques rapides, faciles et reproductibles et sont compatibles avec les principaux systèmes automatisés de chromatographie en phase liquide ou le traitement manuel des seringues (voir le Tableau 1 pour les propriétés générales des cartouches). Les cartouches se fixent directement aux systèmes ÄKTA™ ou FPLC sans connecteurs supplémentaires. Le kit d’accessoires inclus permet d’adapter facilement les cartouches pour une utilisation avec les raccords de seringue Luer-Lok™ ou les tubulures de 1/16’. Ces cartouches peuvent être régénérées plusieurs fois pour la purification par affinité.

Caractéristiques de l’agarose à forte capacité de streptavidine :
• Streptavidine : protéine recombinante streptavidine purifiée (53 kDa, pI quasi neutre) ; tétramérique avec quatre sites de liaison à la biotine par molécule
• Le support en résine d’agarose est réticulé à 6 % d’agarose en microbilles (CL-6B), la résine la plus populaire pour les méthodes de purification par affinité protéique
• Inerte et stable- La streptavidine est immobilisée par des liaisons covalentes sans frais et résistantes à la lixiviation, ce qui entraîne une faible liaison non spécifique et permet de multiples utilisations sans diminution du rendement
• Haute capacité : Cette variété de microbilles a une charge dense de streptavidine immobilisée, offrant une capacité de liaison supérieure à 10 mg de BSA biotinylée par ml de résine
• Deux formats : disponibles en plusieurs tailles de flacons de pâtes de résine et en cartouches de chromatographie et en conditionnements de 1 ml et 5 ml

Propriétés de l’agarose en microbilles réticulée à 6 % (CL-6B) :
• Stabilité du pH : 2 à 14 (court terme) ; 3 à 13 (long terme)
• Dimension moyenne des particules : 45 à 165 microns
• Limite d’exclusion : 10 000 à 4 000 000 daltons
• Débit maximum recommandé : 4 ml/minute (colonne de 1 ml), 5 ml/min (colonne de 5 ml)
• Vitesse linéaire maximale : 30 cm par heure
• Pression maximale : 0,3 MPa, 43,5 psi ou 3 bar

Les cartouches de chromatographie en streptavidine haute capacité Pierce se composent de streptavidine recombinante purifiée immobilisée de façon covalente à haute densité sur une agarose en microbilles réticulée à 6 % de haute qualité. Les anticorps biotinylés, les protéines, les peptides, les acides nucléiques et d’autres molécules ou complexes d’interaction peuvent être capturés, immunoprécipités, éliminés ou purifiés à partir d’échantillons, à l’aide de cette résine de streptavidine.

La streptavidine est une protéine tétramérique contenant quatre sites de liaison à la biotine comme l’avidine. La protéine native issue des Streptomyces avidinii est exempte de glucide, a un pI acide de 5,5 et une masse de 75 kDa. La protéine recombinante utilisée pour fabriquer les résines de streptavidine Pierce a un point isoélectrique proche de la neutralité et une masse de 53 kDa. La streptavidine montre généralement moins de liaison non spécifique que l’avidine (issue du blanc d’œuf de poule) en raison de l’absence de glucides.

Pour en savoir plus, consulter : Cartouches de chromatographie pour le dessalage et la purification par affinité