L’ADN polymérase Platinum™ Tfi Exo(-) est l’ADN polymérase recombinante Tfi Exo(-) complexée avec un mélange d’anticorps exclusif qui inhibe l’activité de la polymérase à température ambiante, ce qui permet la configuration de la réaction à température ambiante. L’activité est restaurée après l’étape initiale de dénaturation en cycle PCR à 94°C, offrant un “démarrage à chaud” automatique pour une amélioration de la spécificité, de la sensibilité et du rendement. L’ADN polymérase Tfi Exo(-) est purifiée à partir d’E. coli. Elle exprime des mutants clonés du gène de l’ADN polymérase Thermus filiformis. Cette enzyme a une activité de la polymérase de 5’ → 3’, mais elle n’a pas d’activité des exonucléases de 5’ → 3’ et de 3’ → 5’ pour améliorer le rendement et la robustesse. L’ADN polymérase Tfi Exo(-) est stable à la chaleur et synthétisera l’ADN à des températures élevées à partir de modèles premier brins en présence d’une amorce.

Applications
L’ADN polymérase Platinum™ Tfi Exo(-) peut être utilisée dans des protocoles qui utilisent actuellement l’ADN polymérase Platinum™ Taq sans modification. Les performances de la PCR sont comparables à celles de Platinum™ Taq en termes de rendement, de spécificité, de fidélité et de robustesse. Tout comme Platinum™ Taq, l’ADN polymérase Platinum™ Tfi Exo(-) possède une activité de transférase terminale non dépendante du modèle qui ajoute une désoxyadénosine (A) unique aux extrémités 3’ des produits PCR.