eBioscience™ Calcein AM Viability Dye (UltraPure Grade)

Calcein AM est un colorant de marquage de cellules vivantes perméables aux membranes. Lorsqu’elles pénètrent dans la cellule, les estérases intracellulaires clivent le groupe ester acétoxyméthyle (AM), ce qui donne le colorant fluorescent de calcéine imperméable à la membrane. Les cellules apoptotiques et mortes avec des membranes cellulaires compromises ne retiennent pas la calcéine. La calcéine est excitée de manière optimale à 495 nm et son pic d’émission est de 515 nm. Pour la microscopie fluorescente, la calcéine peut être détectée à l’aide des ensembles de filtres appropriés. Pour l’analyse par cytométrie en flux, elle peut être excitée avec le faisceau laser bleu (488 nm) et détectée à l’aide de filtres pour FITC / Alexa Fluor™ 488 (530 / 30). Pour la cytométrie en flux multicolore, des concentrations comprises entre 5 et 20 nM sont recommandées pour garantir le succès de la compensation. La co-coloration avec l’annexine V ou 7-AAD est recommandée pour permettre une résolution optimale entre les cellules vivantes et mortes / apoptotiques. Si l’analyse à une seule couleur est souhaitée, une meilleure résolution entre les cellules vivantes et mortes / apoptotiques peut être obtenue en utilisant Calcein Blue AM (réf. 65-0855) ou le violet de calcéine 450 AM (réf. 65-0854).

Poids moléculaire : 994,86
Excitation maximale : 495 nm
Pic d’émission : 515 nm

La calcéine AM doit être reconstituée dans une solution DMSO fraîchement ouverte de haute qualité.
Une fois reconstituée, elle doit être conservée à -20°C avec un dessiccant et utilisée rapidement. Évitez les cycles de congélation-décongélation.

Pureté
> 95% telle que déterminée par HPLC.

Application rapportée
Analyse par cytométrie en flux, microscopie