Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 780 est un colorant de viabilité qui peut être utilisé pour marquer de manière irréversible les cellules mortes avant les procédures de cryoconservation, de fixation et/ou de perméabilisation. Contrairement aux 7-AAD et à l’iodure de propidium, les cellules marquées avec Les colorants de viabilité fixables peuvent être lavées, fixées, perméabilisées et colorées pour les antigènes intracellulaires, et ce sans perte d’intensité de coloration des cellules mortes. Ainsi, l’utilisation de colorants de viabilité fixables permet d’exclure les cellules mortes de l’analyse lorsque les cibles intracellulaires sont étudiées. Les colorants de viabilité fixables peuvent être utilisés pour marquer les cellules de toutes les espèces.

Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 780 peut être excité par le faisceau laser rouge (633 nm) et présente un pic d’émission de 780 nm qui peut être détecté à l’aide d’un filtre passe-bande 780/60 (équivalent à APC-eFluor™ 780 ou APC-Alexa Fluor™ 750). Assurez-vous que votre instrument est capable de détecter ce colorant. Pour la compensation, il est recommandé d’utiliser un échantillon des cellules d’intérêt colorées avec le colorant de viabilité fixable. Si le pourcentage de cellules mortes est censé être inférieur à 5 %, il est alors recommandé de prendre une petite aliquote de cellules et de les chauffer à 65°C pendant 1 minute, puis de les placer immédiatement sur la glace pendant 1 minute. Après ce traitement, les cellules tuées par la chaleur peuvent être combinées selon le ratio 1 : 1 avec des cellules vivantes, puis colorées avec le colorant de viabilité fixable. Nos tests suggèrent que la compensation de la plupart des détecteurs est négligeable, la compensation de PE-Cyanine7 étant la plus élevée à moins de 5 %. Les valeurs de compensation réelles dépendent de l’instrument spécifique à chaque chercheur, des ensembles de filtres et des réglages de tension du TPM.

Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 780 est fourni sous forme de solution pré-diluée préparée dans un DMSO anhydre de haute qualité. Il doit être protégé de la lumière et de l’humidité. Conserver à -70°C avec un dessiccant. Il peut être congelé et décongelé jusqu’à 20 fois. Laissez le flacon s’équilibrer à température ambiante avant l’ouverture.

Application signalée
Analyse cytométrique de flux