eBioscience™ Fixable Viability Dye eFluor™ 520

Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 520 est un colorant de viabilité qui peut être utilisé pour marquer de manière irréversible les cellules mortes avant les procédures de cryoconservation, de fixation et/ou de perméabilisation. Contrairement aux 7-AAD et à l’iodure de propidium, les cellules marquées avec des colorants de viabilité fixables peuvent être lavées, fixées, perméabilisées et colorées pour les antigènes intracellulaires, et ce sans perte d’intensité de coloration des cellules mortes. Ainsi, l’utilisation de colorants de viabilité fixables permet d’exclure les cellules mortes de l’analyse lors de l’étude des cibles intracellulaires. Les colorants de viabilité fixables peuvent être utilisés pour marquer les cellules de toutes les espèces.

Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 520 peut être excité par le faisceau laser bleu (488 nm) et présente un pic d’émission de 522 nm qui peut être détecté à l’aide d’un filtre passe-bande 530 / 30 (équivalent à FITC). Assurez-vous que votre instrument est capable de détecter ce colorant. Pour la compensation, il est recommandé d’utiliser un échantillon des cellules d’intérêt colorées à l’aide du colorant de viabilité fixable. Si le pourcentage de cellules mortes est censé être inférieur à 5 %, il est alors recommandé de prendre une petite aliquote de cellules et de les chauffer à 65°C pendant 1 minute, puis de les placer immédiatement sur de la glace pendant 1 minute. Après ce traitement, les cellules tuées par la chaleur peuvent être combinées selon le ratio 1:1 avec des cellules vivantes, puis colorées avec le colorant de viabilité fixable.

Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 520 est fourni sous forme de solution pré-diluée préparée dans du DMSO anhydre de haute qualité. Il doit être conservé à l’abri de la lumière et de l’humidité. Conserver à une température inférieure ou égale à -70°C avec un dessiccant. Il peut être congelé et décongelé jusqu’à 20 fois. Laisser le flacon s’équilibrer à température ambiante avant ouverture.

Application rapportée
Analyse par cytométrie en flux