Yeast beta-Galactosidase Assay Kit

Le kit de dosage de la β-galactosidase dans la levure Thermo Scientific est spécialement formulé pour les cellules de levure et convient parfaitement pour l’identification des interactions des protéines in vivo avec des systèmes de double hybride.

Caractéristiques du kit de dosage de la bêta-galactosidase dans la levure :

• Lyse efficace des cellules de levure et système de détection colorimétrique
• Dosage quantitatif ou qualitatif pour les colonies de levures en culture en milieux solides ou en suspension
• Dosage colorimétrique facilement mesuré dans un lecteur de plaques ou un spectrophotomètre (420 nm)
• Adaptable aux microplaques à 96 puits ou aux formats de dosage de tubes
• Permet aux cellules obtenues à partir de milieux solides ou de culture liquide d’être dosées directement sans étape de récolte ou de lavage.• Réalisez des tests de criblage homogènes ou mesurez l’activité de manière secondaire après la lyse cellulaire
• Également compatible avec les lysats préparés d’autres espèces telles que les bactéries

Le kit de dosage de la β-galactosidase dans la levure permet une détermination qualitative ou quantitative de l’activité de la β-galactosidase en solution directement à partir de colonies en culture en milieu solide. Une partie de la colonie est mise en suspension dans un mélange de réactif d’extraction de protéines de levure Thermo Scientific Y-PER et de tampon de dosage de la β-galactosidase. Après une brève période d’incubation, la solution devient jaune à partir de l’hydrolyse de la o-nitrophényl-β-D-galactopyranoside (ONPG) donnant o-nitrophénol (ONP) et galactose dans une solution légèrement alcaline. Le dosage devient quantitatif s’il est étalonné au nombre de cellules en mesurant la densité optique à 660 nm.

Le gène codant la β-galactosidase (lacZ) d’E. coli a été largement utilisé comme gène rapporteur dans de nombreux organismes procaryotes et eucaryotes différents. L’activité de la β-galactosidase est également couramment utilisée comme indicateur des interactions protéine-protéine in vivo avec des systèmes à double hybride. La longueur d’interaction est vérifiée ou quantifiée à l’aide d’un dosage de l’activité de la β-galactosidase.