ActivX™ TAMRA-FP Serine Hydrolase Probe

Les sondes de site actif Thermo Scientific ActivX sont particulièrement avantageuses pour déterminer les niveaux d’enzymes actives par rapport à d’autres techniques de profilage d’expression protéique qui n’en mesurent que l’abondance. Étant donné que de nombreuses enzymes protéolytiques de la famille de l’hydrolase à sérine sont exprimées en tant que proenzymes inactives (zymogènes), l’ActivX FP ne sonde l’enrichissement sélectif que sur les enzymes qui sont fonctionnellement actives et biologiquement pertinentes au moment du marquage. Cette fonctionnalité permet également d’effectuer un screening sélectif d’inhibiteurs ou d’autres conditions modifiant l’activité enzymatique.

Les hydrolases à sérine actives marquées avec les sondes ActivX FP peuvent être détectées et quantifiées par transfert Western, imagerie par gel fluorescent ou spectrométrie de masse à l’aide d’une étiquette compatible. La sonde TAMRA-FP peut être utilisée pour étiqueter et détecter les hydrolases à sérine actives dans les échantillons par imagerie sur gel fluorescent, électrophorèse capillaire ou spectrométrie de masse. La sonde Azido-FP est utilisée en association avec une étiquette dérivée de phosphine ou d’alcyne destinée à la détection ou à l’enrichissement. Les sondes Desthiobiotin-FP peuvent être utilisées à la fois pour l’enrichissement et la détection des protéines actives de l’hydrolase à sérine par transfert Western.

La superfamille de l’hydrolase à sérine est une des familles d’enzymes les plus importantes et les plus diversifiées parmi les protéomes eucaryotes. Les hydrolases à sérine sont généralement regroupées en deux grandes familles : les protéases à sérine (par exemple, la trypsine, l’élastase et la thrombine) et les hydrolases à sérine métaboliques. Les hydrolases à sérine métaboliques sont divisées en plusieurs sous-classes enzymatiques (par exemple, estérases, lipases, amidases et peptidases) en fonction de la structure, du mécanisme catalytique et de la préférence du substrat.